Identificación y caracterización diferencial de flavin monooxigenasa en Fasciola hepatica susceptible y resistente a triclabendazole

LAMENZA P.; SCARCELLA S.; FERNANDEZ V.; SOLANA H.

Congreso; I Congreso internacional de zoonosis y enfermedades emergentes. VII congreso Argentino de zoonosis.; 2011

IDENTIFICACIÓN Y CARACTERIZACIÓN DIFERENCIAL DE FLAVIN MONOOXIGENASA EN FASCIOLA HEPATICA SUSCEPTIBLE Y RESISTENTE A TRICLABENDAZOLE   P. Lamenza, S. Scarcella, V. Fernandez y H. Solana   Laboratorio de Biología Celular y Molecular – Facultad de Ciencias Veterinarias – Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires - Tandil – Argentina E-mail:   La fasciolosis, es una zoonosis emergente producida por el trematodo Fasciola hepatica con ubicación en el hígado de animales herbívoros y el hombre. Ante una fasciolosis se utiliza triclabendazole (TCBZ), un antihelmíntico benzimidazólico halogenado, que despolimeriza los microtúbulos del parásito provocando la pérdida de función y posterior muerte. En general TCBZ es rápidamente metabolizado en el hígado del hospedador y en fracciones subcelulares del trematodo a su metabolito sulfóxido siendo éste el que genera el efecto antiparasitario para posteriormente ser sulfoxidado a la forma sulfona inactiva eliminándose de esta forma. Por ello, su eficacia antiparasitaria dependerá del tiempo que perdura la concentración tóxica en el interior del parásito. Hoy, el uso indiscriminado de TCBZ ha generado en diversas regiones del mundo cepas resistentes a dicho fasciolicida. Trabajos previos demuestran que una de las causas de la expresión del fenómeno de resistencia a TCBZ por parte de F. hepatica sería debido a una sobreexpresión de la actividad enzimática de la vía Flavin Monooxigenasa (FMO) pero se desconoce si la misma es debida a sobreexpresión del mRNA correspondiente o a mutaciones puntuales del gen que codifica para FMO. En el presente trabajo se realizó la identificación del gen para FMO mediante RT-PCR a partir de primers específicos. Se detectaron diferencias significativas en la expresión de mRNA entre las cepas sensibles y resistentes. En el caso de la cepa resistente, la expresión del mRNA correspondiente a FMO fue 1.5 veces mayor que en la sensible; lo cual fue cuantificado mediante el programa ImageJ. Dicho resultado confirma que las enzimas FMOs no solo estarían involucradas en los mecanismos de detoxificación, sino que también participarían activamente en el desarrollo del fenómeno de resistencia al antihelmíntico fasciolicida  TCBZ por parte del trematodo F. hepatica.