IDENTIFICACIÓN DEL TRANSPORTADOR GLICOPROTEÍNA P EN DIFERENTES CEPAS DE Fasciola hepatica

SCARCELLA S.; SOLANA H.; FELIPE A.; ALZOLA R. Y LANUSSE C

FCV-UBA. Buenos Aires

Jornada; XVIII Jornadas Argentinas y XIII Jornadas Latinoamericanas de Farmacotoxicología Veterinaria; 2008

La Fasciolasis, producida por Fasciola hepatica es una enfermedad zoonótica de zonas subtropicales y tropicales. Ante una fasciolasis se utiliza triclabendazole (TCBZ), un antiparasitario benzimidazólico halogenado que despolimeriza los microtúbulos del parásito con la consecuente muerte. Su uso indiscriminado ha generado cepas resistentes debiéndose ampliar los conocimientos sobre los mecanismos de detoxificación y resistencia antihelmíntica. Los helmintos poseen mecanismos de detoxificación ante los xenobióticos en los cuales se incluyen los antiparasitarios. Dichos mecanismos se basan en procesos oxidativos generados principalmente por FMO y Cyt P450 aunque inicialmente no debería descartarse la participación de la Glicoproteína P (Gp P), una proteína de membrana que actúa como bomba de eflujo expulsando endo y xenobióticos al medio extracelular. El objetivo del presente trabajo fue localizar la presencia y distribución de Gp P en F. hepatica sensible y resistente a TCBZ. Se inocularon 4 ovejas adultas sanas con 200 metacercarias cada una (dos ovejas con la cepa Cullompton, sensible a TCBZ, y dos con la cepa Sligo, resistente a TCBZ). Los animales inoculados fueron estabulados y mantenidos con alimentación ad libitum. Después de 4 meses y tras el diagnóstico coproparasitológico y hepatograma confirmando la presencia de fasciolas adultas en el hígado, se abordó cavidad abdominal capturándose los ejemplares desde el interior de los canalículos biliares y vesícula biliar sumergiéndolos en fijador Bouin hasta su procesamiento. Se procesaron según las técnicas histológicas corrientes realizando cortes seriados longitudinales montados en portas gelatinizados. El estudio inmunohistoquímico se  realizó según el método de peroxidasa-antiperoxidasa utilizando como primer anticuerpo un anticuerpo monoclonal dirigido contra Gp P. Los resultados obtenidos confirmaron la presencia de dicha bomba de eflujo en ambas cepas con una distribución localizada fundamentalmente en los enterocitos y en menor cuantía en las células vitelógenas y espículas. Dicha distribución se manifestó en ambas cepas de manera similar no detectándose diferencias considerables en su distribución y expresión, aunque no debería descartarse que el incremento del eflujo pueda ser un factor más que aporte al mecanismo de resistencia ya que otros transportadores de eflujo podrían también jugar algún rol en dicho fenómeno. Estos resultados preliminares aportan a la comprensión de los mecanismos de resistencia antiparasitaria dándole más relevancia a los mecanismos de detoxificación por oxidación a través de las vías FMO o P450 y constituyen además un aporte a la interpretación de la actividad fasciolicida de TCBZ siendo parte de un proyecto general que se desarrolla en nuestros laboratorios tendiente a la ampliación de conocimientos referidos al mecanismo de acción de los antihelmínticos benzimidazólicos.