Caracterización enzimatica y proteica en ovinos infectados con una cepa de Fasciola hepatica resistente al triclabendazole

FERNÁNDEZ V.; ALZOLA P. ; SCARCELLA S.; OLAECHEA F.; LARROZA M.; SOLANA H.

Encuentro; V Encuentro Anual Biologos en Red; 2010

La fasciolosis es una zoonosis parasitaria causada por el trematodo Fasciola hepatica. Dicho trematodo parasita el hígado de animales herbívoros y al hombre. En el caso de los rumiantes, la enfermedad se expresa en importantes pérdidas de peso, disminución de la producción láctea, reducción de la eficiencia reproductiva y bajas conversiones de la ingesta, sumado al decomiso de hígados y reses de calidad inferior. El hígado es el principal proveedor de la albúmina plasmática entre otras proteínas séricas por lo cual una insuficiencia hepática severa generalmente transcurre con una hipoproteinemia. Ante una lesión tisular hepática parte de sus enzimas citoplasmáticas tales como aspartato aminotransferasa (AST) y alanina aminotransferasa (ALT) son liberadas al torrente sanguíneo pudiendo ser detectadas en suero a través de análisis espectrofotométricos específicos de la actividad de dichas enzimas. Ante una fasciolosis se utiliza principalmente el triclabendazole (TCBZ), un antihelmíntico benzimidazol halogenado que despolimeriza los microtúbulos del parásito con la consecuente pérdida de sus funciones, desprendimiento y muerte. TCBZ posee excelente eficacia contra los estadios juveniles y adultos aunque actualmente, su indiscriminado uso, ya ha generado la manifestación de fenómenos de resistencia. El objetivo del presente trabajo fue evaluar la actividad de enzimas marcadoras de daño hepático (AST y ALT) y el perfil de proteínas séricas totales de ovinos tratados y controles en función del tiempo pre y pos inoculación de una cepa de F. hepatica resistente a TCBZ, Se utilizaron 15 corderos Merino de 5 meses de edad, (peso promedio 26,2 kg) y libres de parásitos. Diez corderos se alojaron juntos en un potrero libre de Fasciola, con pastoreo y agua a disposición. Fueron infestados vía ruminal por sonda esofágica, con 200 metacercarias cada uno. Se conformaron al azar 2 grupos, el Grupo 1 de 5 corderos que a los 79 días pos inoculación fueron tratados con 12 mg/Kg PV de TCBZ y el Grupo 2 de 5 corderos que se mantuvieron sin tratamiento. Simultáneamente en otro potrero libre de Fasciola se mantuvieron 5 corderos sanos (sin inocular) como controles (Grupo 3). Se tomaron muestras individuales de sangre y de materia fecal de todos los ovinos al inicio del ensayo, previo a la infección (día 0) y a los 49, 63, 79, 94 y 109 días. El 100% de los corderos infectados fueron detectados por el test de ELISA, como infestados por Fasciola hepatica en las muestras extraídas el día 49 pos infestación, momento en que se expresaron los mayores valores de densidad óptica. Al finalizar el ensayo se necropsiaron los corderos y se recuperaron los hígados para conteo de parásitos. Por otro lado, los corderos del grupo control, fueron negativos a todos los análisis realizados y a la necropsia tenían el hígado sano, sin presencia de F. hepatica. Cuando se analizó el perfil proteico sérico (Método de Bradford) en función del tiempo, dichas proteínas para el caso del lote tratado (Grupo 1) y del lote control (Grupo 3) se mantuvieron siempre dentro de los valores normales mientras que las correspondientes al lote sin tratar (Grupo 2) tuvieron una ligera disminución pero sin significancia estadística. En el análisis de las enzimas en estudio mientras que el Grupo 1 (tratados) y los controles (Grupo 3) mantuvieron sus valores normales el lote sin tratar (Grupo 2) presentó un aumento (hasta 10X) de la actividad de la enzima ALT corroborando una leve  lesión hepática Se concluye que si bien los animales infectados expresaron un aumento enzimático y una ligera disminución de las proteínas séricas, sus variaciones  fueron representativas de una infección leve probablemente debido a que la carga parasitaria no fue lo suficientemente importante como para provocar serio daño hepático.