Aumento de la actividad de ciertas enzimas detoxificantes en Fasciola hepatica expuesta a triclabendazole in vivo

SCARCELLA S. ; ALZOLA P.; SOLANA H.

Esperanza, Sta. Fe.

Jornada; XV Jornadas Latinoamericanas y XX Argentinas de Farmaco-Toxicología Veterinaria; 2010

Facultad de Ciencias Veterinarias de la Universidad Nacional del Litoral

La Fasciolosis es una enfermedad zoonótica parasitaria causada por el trematodo Fasciola hepatica. Su control se basa en el uso de Triclabendazole (TCBZ), un antihelmíntico benzimidazol halogenado que posee excelente eficacia contra adultos y estadíos juveniles. TCBZ es metabolizado a su metabolito activo TCBZ sulfóxido (TCBZSO) en el hígado del hospedador y en fracciones subcelulares del parásito (1), conociéndose además que F. hepatica posee significativamente mayor capacidad sulfoxidativa que nematodes y cestodes (2). En general, la mayoría de los seres vivos incluidos los helmintos evaden el efecto de los xenobióticos a través de: i) mutaciones del receptor, ii) sobreexpresión de bombas de eflujo, y/ó  iii) sobreexpresión de las vías metabólicas que procesan dicho xenobiótico. La expresión de uno o varios de estos mecanismos sería la generadora del fenómeno de resistencia al xenobiótico actuante. La resistencia a los antihelmínticos está en plena expansión en todo el mundo, reportándose en la actualidad cepas de F. hepatica resistentes a TCBZ (3) lo que hace necesario la ampliación de los conocimientos de los mecanismos de detoxificación que dicho trematodo posee. En el presente trabajo se evaluó  la actividad Carbonil Reductasa (CR), Nitrofenil Acetato Estearasa (NFAE) y Glutation-S-Transferasa (GST) en la fracción citosólica de adultos de F. hepatica recuperados de hígados de ovinos tratados con Triclabendazole. Se inocularon cinco ovinos adultos sanos con 200 metacercarias c/u de F. hepatica susceptible a TCBZ. Se confirmó la infección 16 semanas después por la presencia de huevos en heces y aumento de la actividad sérica de Glutamato Dehidrogenasa y Gamma Glutamil Transferasa. Cuatro ovinos fueron tratados con TCBZ (10 mg/kg.) y sacrificados a las 3, 24, 48 y 60 hs post-tratamiento conjuntamente con el ovino control. Las fasciolas adultas recuperadas fueron homogeneizadas (1:2) en buffer Fosfato pH 7.3, obteniéndose la fracción citosólica por centrifugación a 100.000 g durante 1 h. a 4º C. Al analizar la actividad de las enzimas se observó una mayor expresión a las 24 y 48 hs post administración del fármaco. Estos resultados fueron significativamente más altos que los obtenidos a las 3 h siendo este valor similar a los obtenidos en las fasciolas controles no expuestas a la droga. La actividad enzimática retornó a niveles similares a los controles en las fasciolas de 60 h post exposición al fármaco. En suma, la mayor actividad fue observada inmediatamente después a cuando se manifestó el pico de concentración de TCBZSO en las fasciolas recuperadas de las ovejas tratadas. La acción del TCBZ y su metabolito indujeron un estrés oxidativo secundario que explicaría el incremento en la actividad enzimática analizada como un mecanismo defensivo del trematodo. Estos resultados preliminares aportan al entendimiento de los mecanismos subyacentes referidos al metabolismo y disposición del TCBZ y su actividad en el parásito blanco.