En Pseudomonas putida A ATCC 12633 fosfatidilcolina actúa como un reservorio temporario de aluminio

BOERIS, P.S.; LUCCHESI, G.I.

Jornada; II Reunión Conjunta de Sociedades de Biología de la República Argentina; 2011

Pseudomonas putida A ATCC 12633 crece en presencia del compuesto de amonio cuaternario sintético tetradeciltrimetilamonio (TDTMA) utilizándolo como única fuente de C y N. La adición de Al+3 al medio, necesario para reanudar el crecimiento bacteriano y lograr la completa mineralización de TDTMA, provoca, entre otros cambios, un incremento en el contenido de fosfatidilcolina (PC) por activación de una fosfatidilcolina sintasa (PCS). La búsqueda de genes homólogos a PCS de S. meliloti en el genoma secuenciado de P. putida KT2440 (cepa de referencia) arrojó como resultado un posible candidato, PP0731. En este trabajo, el gen homólogo a pp0731 en P. putida A ATCC 12633 fue interrumpido por la inserción de un cassette de antibiótico. En la mutante obtenida (P. putida PB01), no se observaron niveles detectables de PC, indicando que la síntesis de PC ocurre por la vía de la PCS en este organismo. P. putida PB01 fue mucho más sensible que la cepa salvaje cuando se enfrentó al aluminio, alcanzando una disminución del 50 % en el número de células viables. Por ensayos de fluorescencia utilizando el reactivo de Morin (compuesto que se une al Al3+ formando un complejo fluorescente Al3+-Morin), se observó, en concordancia con la ausencia de PC, menor intensidad de fluorescencia en las membranas de P. putida PB01 respecto a lo que se detecta en su cepa parental. Estos resultados ponen en evidencia que PC participa en la respuesta bacteriana al Al+3 actuando posiblemente como en reservorio temporario del ión. El mecanismo propuesto es la formación, en la membrana de P. putida, de complejos Al3+-PC los cuales, por un lado, disminuyen el contenido de Al3+ libre que puede ser tóxico para el microorganismo y, por otro, mantienen disponible Al3+ para cuando P. putida necesite utilizarlo para lograr la completa mineralización de TDTMA.