Rol de los fosfolípidos frente al estrés ocasionado por tetradeciltrimetilamonio en una cepa de P. putida delecional en cardiolipina sintasa

LÓPEZ, G.A.; HEREDIA, R.; BOERIS, P.S.; LUCCHESI, GI..

Jornada; II Reunión Conjunta de Sociedades de Biología de la República Argentina; 2011

P. putida A ATCC 12633 responde al detergente catiónico tetradeciltrimetilamonio (TDTMA) a través de cambios cuantitativos en sus fosfolípidos de membrana, con aumento en el contenido de fosfatidilglicerol (PG) y ácido fosfatídico (PA) y disminución en cardiolipina (CL). A partir del DNA genómico de P. putida A ATCC 12633 se clonó una secuencia homóloga a un fragmento del gen pp5364 de P. putida KT2440, descripto como cardiolipina sintasa (cls). La secuencia fue interrumpida por inserción de un cassette de resistencia a gentamicina y, corroborada la mutación, se evaluaron las modificaciones a nivel de fosfolípidos de membrana de esta cepa, P. putida A ATCC 12633 Δcls, crecida en diferentes condiciones nutricionales. Cuando ambas cepas, mutante y parental, se hicieron crecer en medios salinos con fuentes preferenciales de carbono y nitrógeno, no se observaron diferencias significativas en el contenido y la distribución de CL en la membrana entre ambas cepas, detectándose las mayores concentraciones de éste fosfolípido en los polos de las células y en regiones próximas a los septos en células en división. Estos resultados plantean que, posiblemente, otro gen es el responsable de la síntesis de CL en P. putida A ATCC 12633. Cuando P. putida A ATCC 12633 Δcls creció en medios salinos con fuentes preferenciales de carbono y nitrógeno y se expuso a TDTMA, las modificaciones más significativas detectadas a nivel de fosfolípidos, respecto a células no expuestas al detergente, fueron los aumentos en el contenido de PG y PA (2 y 10 veces, respectivamente) sin detectarse cambios en los niveles de CL. En conjunto, estos resultados permiten concluir que PG y PA son los fosfolípidos más importantes involucrados en la respuesta celular al biocida, utilizando principalmente PA para neutralizar la elevada carga positiva de la molécula de TDTMA.