PATRON DE CLONALIDAD MEDIANTE ERIC-PCR EN CEPAS DE SALMONELLA GALLINARUM BIOVAR GALLINARUM AISLADAS EN GRANJAS CON BROTES DE TIFOSIS AVIAR DE ARGENTINA

SORIA MA; GALLI L; LONDERO A; BUENO DJ

CABA

Congreso; XV Congreso Argentino de Microbiología; 2019

Asociación Argentina de Microbiología

Las enterobacterias contienen secuencias cortas, repetidas y esparcidas,llamadas Enterobacterial Repetitive Intergenic Consensus (ERIC), que han sido utilizadas ampliamente en la identificación de brotes infecciosos bacterianos. Usando estas secuencias ha sido posible discriminar serotipos estrechamente relacionados de la misma especie, y grupos de cepas no relacionadas clonalmente. La enterobacteria denominada Salmonella Gallinarum biovar Gallinarum (SG) produce la Tifosis aviar (TA), una enfermedad septicémica específica de aves adultas. Los brotes de TA usualmente comienzan con una fuerte disminución del consumo de alimento, y de la producción de huevos. Por otro lado, la tasa de mortalidad en la TA aguda es alta. El objetivo de este trabajo fue determinar mediante ERIC-PCR los patrones de clonalidad entre las cepas de SG aisladas en granjas con brotes de TA (GBTA) en Argentina.Se realizó la técnica de ERIC-PCR en 198 cepas de SG aisladas de GBTA pertenecientes a las provincias de Entre Ríos (152, ER), Santa Fe (32, SF), Mendoza (6, M), Tucumán (4, T),Jujuy (2, J), Buenos Aires (1, BA) y la cepa vacunal 9R (CV). La extracción de ADN se realizó mediante Kit comercial. Los cebadores usados fueron ERIC1R (5´-ATG TAA GCT CCT GGG GAT TCA C-3´) y ERIC2 (5´-AAG TAA GTG ACT GGG GTG AGC G-3´). Los fragmentos amplificados se resolvieron mediante electroforesis en gel de agarosa al 2%. Los datos fueron analizados con el software BioNumerics 6.6 y el dendrograma fue construido utilizando el método UPGMA y coeficiente de similitud DICE.El dendrograma dio lugar a 32 patrones dentro de los cuales, 19 tuvieron 100% de similitud (clusters) y 13 patrones fueron únicos (PU). A la provincia de ER le correspondieron 6 clusters y a SF 14 clusters. Por otro lado, 67 cepas de SG (67/198) se agruparon en un único cluster las cuales se aislaron en diferentes años, y pertenecieron a las provincias de SF (2014), ER (2014-15-16), J (2016), T (2015) y BA (2015). La CV compartió el cluster con cepas de SG pertenecientes a las provincias de SF, ER y M. Con respecto a los PU, los mismos pertenecieron a las provincias de ER (7 cepas) y SF (6 cepas).En base a lo observado, se puede inferir que las cepas de SG son muy clonales debido a la gran cantidad de cepas que comprenden cada cluster. Además es importante observar que existen cepas de campo con el mismo patrón de bandas que la cepa vacunal 9 R. Por otro lado, existen los mismos clones circulantes deSG en varias provincias y en diferentes años, siendo clones persistentes en el tiempo. Si bien la técnica de ERIC-PCR permite realizar un análisis general de todos los aislamientos, se deberían corroborar estos resultados utilizando una técnica de subtipificación con mayor poder discriminatorio.