Desarrollo de PCRs para la identificación de los serogrupos STEC no-O157 más frecuentes en Argentina

GUGLIADA MJ; CHINEN I; MILIWEBSKY E; DEZA N; CARBONARI CC; BASCHKIER A; MANFREDI E; LEOTTA GA; GALLI L; RIVAS M

CABA

Congreso; III Congreso Argentino de Microbiología de Alimentos; 2006

Asociación Argentina de Microbiología

En Argentina el 60% de los casos de síndrome urémico hemolítico (SUH), está asociado a Escherichia coli productor de toxina Shiga (STEC) siendo el 40% restante debido a cepas STEC O26:H11, O91:H21, O103:H2 y O145:NM, entre otros. La detección de cepas STEC no-O157 requiere de la identificación de la toxina Shiga (Stx) o de sus genes codificantes, seguido por el seroagrupamiento con antisueros específicos. La técnica de PCR ha sido descripta para la identificación del serogrupo de cepas STEC para una rápida confirmación en casos clínicos, sospecha de brotes y muestras de alimentos. En este estudio se desarrolló e implementó la metodología de PCR, utilizando primers (Operon Biotechnologies) para la detección de genes específicos implicados en la ruta de biosíntesis del antígeno somático de los serogrupos STEC no-O157 más frecuentemente detectados en Argentina. Se estudió un total de 132 cepas STEC no-O157, aisladas de muestras clínicas, alimentos y animales. La técnica de PCR para O26 (D´ Souza y col., 2002), O91 (Perelle y col., 2002), O111 (Paton y col., 1997), O113 (Paton y col., 1999), O121 (Fratamico y col., 2003) y O145 (Perelle y col., 2003), se realizó según lo descripto, con algunas modificaciones. En el seroagrupamiento por aglutinación en lámina se utilizaron antisueros policlonales monovalentes producidos por el INPB para cada uno de los serogrupos. Del total de las cepas estudiadas 88 fueron positivas por ambas metodologías: O26 (21 cepas), O91 (3), O111 (4), O113 (6), O121 (6), y O145 (48); y 31 negativas que no pudieron ser seroagrupadas por las metodologías ensayadas. Cinco cepas STEC de los serogrupos O26 (1 cepa) O113 (1), O121 (1), y O145 (2) dieron resultado positivo por PCR sin observarse aglutinación por el seroagrupamiento convencional. Cepas de los serogrupos O91 (1 cepa), O113 (3) y O145 (5), dieron aglutinación positiva con el antisuero correspondiente pero resultaron negativas por PCR. En conclusión, en el 90% (n=119) de las cepas STEC no-O157 estudiadas se observó correlación entre los resultados obtenidos por PCR y por seroagrupamiento, sin embargo el 10% de las cepas de diferentes serogrupos, a excepción del O111, presentaron resultados de PCR que no correlacionaron con los obtenidos por serología. Esto podría deberse a una mayor sensibilidad de la PCR ya que detecta directamente los genes involucrados, o a reacciones cruzadas entre diferentes serogrupos. Dado que la serología es una técnica sencilla pero que puede dar reacciones inespecíficas y muchas veces es difícil acceder a los antisueros, hace necesario contar con una técnica adicional como la PCR para complementar los resultados obtenidos por la serología convencional.