REGULACION DE LA FUNCION ENDOTELIAL POR ESTEROIDES SEXUALES

CUTINI, P.; CAMPELO, A.; RAUSCHEMBERGER, M.B.; SANDOVAL, M.; MASSHEIMER, V.

Hotel 13 de Julio, Mar del Plata, Pcia Buenos Aires

Congreso; LV Reunion Anual de Sociedad Argentina de Investigacion Clinica; 2010

SAIC

El objetivo de este trabajo fue investigar el efecto de progesterona (Pg), testosterona (T) y estrona (E1) sobre la función endotelial en cultivos primarios de células endoteliales (CE) murinas. La adhesión de leucocitos y el aumento de la apoptosis son respuestas endoteliales típicas a la injuria vascular. Para evaluar la acción hormonal sobre la adhesión de monocitos (Amf) se los adicionó a CE tratadas con los esteroides en presencia ó ausencia de LPS (inductor de adhesión). E1 inhibió la Amf (21±2,5 vs 15±1,1 cel/cpo, C vs E1, p<0,01). La adhesión inducida por el LPS se bloquea en presencia de Pg ó E1 (23±2.9;37±3;25±2.1;27±2.2 cel/cpo; C, LPS, E1+LPS, Pg+LPS, p<0,01). Como la Amfdepende de puentes entre proteínas de superficie de CE (ICAM-1) e integrinas de los mf, se estudió el efecto de E1 sobre la expresión del ARNm de ICAM-1 en CE tratadas con E1 y LPS. E1 disminuyó su expresión respecto al control y revirtió el aumento inducido por LPS. En mf, la expresión de las integrinas CD11b, CD11c y CD18 (citometría de flujo), disminuyó en 53, 38 y 39% respecto al control (p<0,01) y se revirtió el estímulo de LPS en los tratamientos con E1. Se usó el ensayo de fragmentación de ADN para estudiar la apoptosis de CE. Si bien E1 ó Pg evidenciaron un efecto proapoptótico (7;42;38% ADN fragm/total; C,Pg,E1; p<0,05), el progestágeno fue capaz de atenuar el efecto apoptótico del H2O2 (88; 46% ADN fragm/total; H2O2;Pg+H2O2; p<0,02) mientras que el tratamiento con E1 no lo alteró. Al evaluar la producción de vasoactivos observamos que, si bien Pg, T y E1 estimulan la síntesis de óxido nítrico (NO) en CE (83%, 94%, 85%, Pg 10 nM, E1 10 nM, T 1 nM s/c p<0,001), la acción individual de cada esteroide se modifica en tratamientos hormonales conjuntos (Pg+T; E1+Pg). El NO generado del tratamiento hormonal inhibió la activación y agregación plaquetaria. Los resultados presentados evidencian que la función endotelial es blanco de la acción de los esteroides ováricos.1 inhibió la Amf (21±2,5 vs 15±1,1 cel/cpo, C vs E1, p<0,01). La adhesión inducida por el LPS se bloquea en presencia de Pg ó E1 (23±2.9;37±3;25±2.1;27±2.2 cel/cpo; C, LPS, E1+LPS, Pg+LPS, p<0,01). Como la Amfdepende de puentes entre proteínas de superficie de CE (ICAM-1) e integrinas de los mf, se estudió el efecto de E1 sobre la expresión del ARNm de ICAM-1 en CE tratadas con E1 y LPS. E1 disminuyó su expresión respecto al control y revirtió el aumento inducido por LPS. En mf, la expresión de las integrinas CD11b, CD11c y CD18 (citometría de flujo), disminuyó en 53, 38 y 39% respecto al control (p<0,01) y se revirtió el estímulo de LPS en los tratamientos con E1. Se usó el ensayo de fragmentación de ADN para estudiar la apoptosis de CE. Si bien E1 ó Pg evidenciaron un efecto proapoptótico (7;42;38% ADN fragm/total; C,Pg,E1; p<0,05), el progestágeno fue capaz de atenuar el efecto apoptótico del H2O2 (88; 46% ADN fragm/total; H2O2;Pg+H2O2; p<0,02) mientras que el tratamiento con E1 no lo alteró. Al evaluar la producción de vasoactivos observamos que, si bien Pg, T y E1 estimulan la síntesis de óxido nítrico (NO) en CE (83%, 94%, 85%, Pg 10 nM, E1 10 nM, T 1 nM s/c p<0,001), la acción individual de cada esteroide se modifica en tratamientos hormonales conjuntos (Pg+T; E1+Pg). El NO generado del tratamiento hormonal inhibió la activación y agregación plaquetaria. Los resultados presentados evidencian que la función endotelial es blanco de la acción de los esteroides ováricos.