Mecanismo de acción del alendronato en sistema vascular

CUTINI, P.; RAUSCHEMBERGER, MB.; CAMPELO, A.; MASSHEIMER, V.

Buenos Aires

Congreso; XXX Congreso Anual AAOMM; 2013

AAOMM

Los bisfosfonatos (BP) constituyen una terapia de uso frecuente para el tratamiento de la osteoporosis postmenopáusica. La acción antiresortiva de los BP es mediada por conexina 43 y la vía de señalización ERKs. El estatus hormonal de la menopausia se caracteriza por una disminución de la producción ovárica de estradiol y progesterona, acompañada de niveles plasmáticos sostenidos del estrógeno estrona (E1) debido a su síntesis extragonadal. La terapia de sustitución hormonal con estrógenos combinada con progestágenos sintéticos es una alternativa terapéutica para contrarrestar los signos y síntomas de la menopausia, aún en uso a pesar de los riesgos atribuidos a la misma. Si bien los efectos óseos de los BP son ampliamente conocidos, considerando la importancia del eje óseo-vascular, nos preguntamos cuál es el impacto vascular de los BP en presencia de E1 y acetato de medroxiprogesterona (MPA). Los objetivos del trabajo fueron investigar el mecanismo de acción a través del cual alendronato (ALN) media sus efectos vasculares, y realizar un estudio comparativo de la acción del BP en tratamientos conjuntos con E1 y MPA. Se emplearon cultivos primarios de células endoteliales (CE) y células de músculo liso vascular (CMLV) obtenidos a partir de anillos de aorta de ratas Wistar. Los parámetros que se estudiaron fueron: producción endotelial de óxido nítrico (NO) y migración de CLMV, procesos vitales que afectan la salud vascular. Tiempos cortos de tratamiento (15-30 min) con ALN (5 μM) indujeron un estímulo significativo sobre la producción de NO. El mecanismo de acción del BP involucra la participación de la vía ERKs y el influjo de calcio externo. En presencia de un inhibidor de MEK (PD98059) la acción estimulatoria del ALN sobre NO se suprime (220±20 vs 345±38, 210±21 vs 221±18 nmol de NO/mg proteína; C vs ALN, C+PD vs ALN+PD; p<0.05). El bloqueo del ingreso del calcio de medio extracelular por verapamil (V), un inhibidor de canales de calcio dependiente de voltaje, anuló totalmente la síntesis del vasoactivo inducida por ALN (238±19 vs 245±16 nmol de NO/mg proteína; C+V vs ALN+V; p<0.05). Cuando las CMLV se exponen prolongadamente (21 días) a un medio enriquecido en calcio y fósforo (4 mM calcio, 10 mM β-glicerol fosfato), empleando la técnica de tinción con alizarina observamos que el tratamiento con ALN inhibió parcialmente formación de nódulos de calcio comparado con células controles. Al analizar el tratamiento conjunto de E1 y ALN determinamos que E1 (10 nM) incrementó significativamente la producción basal de NO luego de 15 min de tratamiento hormonal (32% sobre control; p<0.02), y que la exposición simultánea a ALN y E1 potenció el efecto individual de cada uno de ellos (90, 60, 58% sobre control; ALN+E1, ALN, E1; p<0.05). El estudio comparativo con MPA (10 nM) mostró una acción potenciadora de mayor magnitud en el tratamiento conjunto de ALN y MPA sobre el efecto individual en la síntesis endotelial de NO (56, 80, 250% sobre control; ALN, MPA, ALN+MPA; p<0.02). La migración de CMLV es un indicador del deterioro del tono vascular. Empleando ensayos ?wound healing?, demostramos que 48 hs de exposición a MPA indujo un manifiesto aumento en la migración a todas las dosis ensayadas (340-320% sobre control; MPA 1-100 nM; p<0.001). Por su parte, ALN no afecta la migración basal, y a su vez previene parcialmente la movilidad inducida por MPA (344±39 vs 219±24 células/campo; MPA vs MPA+ALN; p<0.001). La acción preventiva de ALN sobre la movilidad de CMLV se corroboró con norepinefrina, un inductor natural de migración vascular. En conclusión, el BP impacta positivamente sobre la homeostasis vascular, situación que se potencia favorablemente cuando se simula un entorno hormonal o terapéutico frecuente en el periodo postmenopáusico.