La inhibicion de 17- b-HSD 1 no afecta el mecanismo de accion reg;n de Estrona en tejido vascular de rata

RAUSCHEMBERGER, M.B.; MASSHEIMER, V.

Hotel 13 de Julio, Mar del Plata, Pcia. Buenos Aires, Rep. Argentina

Congreso; LII Reunion Cientifica Anual de Sociedad Argentina de Investigaci¡§®n Cl¡§ªnica (SAIC); 2007

SAIC

La estrona (E1), y el 17-¦Â-estradiol (E2) son esteroides interconvertibles, reacci¨®n catalizada por la familia de enzimas 17-¦Â-hidroxiesteroide deshidrogenasa (17¦ÂHSD). Previamente demostramos que en tejido vascular de rata, la E1 estimula la s¨ªntesis de vasoactivos e inhibe el crecimiento del endotelio vascular. Los principales componentes celulares de las arterias son las c¨¦lulas endoteliales y las musculares lisas vasculares (CMLV). En el presente trabajo investigamos el efecto directo de la E1 sobre la proliferaci¨®n de CLMV y la participaci¨®n de la 17-¦Â-HSD en el mecanismo de acci¨®n hormonal. En ensayos de proliferaci¨®n celular (incorporaci¨®n de 3H-timidina) observamos que la presencia del compuesto Equilin (Eq) inhibidor de 17-¦Â-HSD tipo 1 (responsable de la conversi¨®n de E1 a E2) no modific¨® el est¨ªmulo sobre la s¨ªntesis de ADN inducido por 24 hs de tratamiento con E1 10nM (91 vs 97% s/c, E1 vs E1+Eq, p<0.001). El inhibidor tampoco modific¨® la acci¨®n estimulatoria de E1 sobre la s¨ªntesis de NO (medido por el m¨¦todo de Griess) (0.82¡À0.05 vs 1.285; 0.78¡À 0.028 vs 1.283¡À 0.037 nmol NO/mg prot. control vs E1 -/+ Eq, p<0.001). Usando ICI 182780, antagonista del receptor de estr¨®geno (RE), observamos que el mismo anul¨® completamente el increment¨® en la incorporaci¨®n de timidina (78¡À6.0 vs 119¡À8.2; 60¡À4.3 vs 72¡À 6.8, cpm 103/mg prot Control vs E1 -/+ ICI, p<0.01). Dado que E1 estimula la actividad PKC, estudiamos su participaci¨®n. 24 hs de tratamiento con TPA100nM (activador directo PKC) estimula la proliferaci¨®n (116%s/c, p<0.001). La inhibici¨®n PKC por el compuesto chelerythrine suprimi¨® la acci¨®n proliferativa de la E1 (53% vs 1% s/c, E1 vs E1+Chel, p<0.01). En ensayos de migraci¨®n celular se observ¨® un mayor desplazamiento celular luego de 72 hs de tratamiento con E1 vs control. Los resultados sugieren que los efectos de E1 en tejido vascular no dependen de su conversi¨®n a E2 y que la acci¨®n proliferativa del esteroide involucrar¨ªa al RE y la v¨ªa PKC.