Regulacion por progesterona de la actividad oxido nitrico sintasa en tejido vascular

RAUSCHEMBERGER, M.B.; MENDIBERRI, J.; SELLÉS, J.; MASSHEIMER, V.

Hotel Intersur (13 de Julio), Mar del Plata, Pcia. de Buenos Aires, Argentina., del 16 al 20 de Noviembre de 2004

Congreso; XLIX Reunion Anual de SAIC; 2004

Sociedad Argentina de Investigacion Clinica (SAIC)

Previamente demostramos que en tejido aórtico de rata, la Progesterona (Pg), estimula la producción de óxido nítrico (NO) en forma no genómica e independiente de la participación del receptor nuclear. Como consecuencia del aumento en NO, la Pg activa la COX (ciclooxigenasa) y estimula la s¨ªntesis de prostaciclina. En este trabajo investigamos las vías mensajeras involucradas en la regulación de NOS por la Pg. Para ello empleamos anillos de aorta aislados de ratas hembras en edad fértil,  tratados "in vitro" con concentraciones fisiológicas de Pg. La actividad NOS se midió usando la técnica de radioconversión de 3H-arginina en 3H-citrulina. Los ensayos tiempo respuesta muestran que a 5 minutos de tratamiento con la hormona estimulan la síntesis de NO en un 98% sobre el control (p<0.05), aumentando a 116% (p<0.01) a los 15 minutos, siendo máximo a los 30min (146%, p<0.01). La acción estimulatoria de la hormona se manifiesta entre 1 y 100 nM. Se estudio la participación del sistema TK y PI3K en el mecanismo de activacion de NOS por Pg. Para ello se midió la actividad NOS en presencia ó ausencia de genisteina (inhibidor de TK)  de compuesto LY 294002 (inhibidor de PI3K). Demostramos que el sistema tirosin kinasa participa en la acción de la hormona. El incremento en NO inducido por Pg luego de 5 minutos de tratamiento, fue suprimido por Genisteína 1 uM (0.37¡À0.13  vs 0.68 ¡À0.09, p<0.05; 0.44 ¡À0.07 vs 0.40¡À0.07, control vs Pg en ausencia ó presencia de geniste¨ína). El mismo efecto supresor se obtuvo en presencia de Ly 294002 1¦ÌM. De acuerdo a lo que reportaramos previamente, la acción no genomica de Pg involucra la activacion PLC y el consecuente aumento de los niveles de diacilglicerol (activador de PKC). Usando chelerytrine como inhibidor de PKC, observamos de 1 y 10 uM chelerytrine suprime totalmente el aumento  en NO inducido por 5 ó por 30 minutos de tratamiento hormonal. Los resultados obtenidos aportan evidencias que, en tejido vascular, la accion estimulatoria de la Pg sobre la actividad NOS es mediada por los sistemas TK/PI3K y PKC.