ESTUDIOS PRELIMINARES DE PROTEINAS IMPLICADAS EN EL RECONOCIMIENTO DE ZONA PELÚCIDA EN ESPERMATOZOIDES DE Chinchilla lanigera

SUAREZ RA; BONILLA F; PUCCI ALCAIDE ANA; GRAMAJO BÜHLER MC

San Miguel de Tucumán

Jornada; XXXV JORNADAS CIENTÍFICAS DE LA ASOCIACIÓN DE BIOLOGÍA DE TUCUMÁN; 2018

ASOCIACIÓN DE BIOLOGÍA DE TUCUMÁN

Existe evidencia que la interacción entre las gametas ocurre por medio de complejos de receptores-ligandos complementarios en ellas. En espermatozoides estos complejos podrían relocalizarse y facilitar la presentación de receptores. La molécula de adhesión espermática -SPAM1- es una proteína con actividad hialuronidasa presente en estos complejos. A menudo la infertilidad masculina se debe a la incapacidad de las gametas para reconocer al ovocito y a pesar de su importancia biológica no está totalmente aclarado y en la chinchilla no hay antecedentes. El objetivo de este trabajo es localizar SPAM1 en espermatozoides de Chinchilla y estudiar su rol en la interacción gamética. Se emplearon animales maduros en periodo reproductor. Espermatozoides epididimarios se fraccionaron: No Capacitados(NC), Capacitados(EC) en medio TH3 (2,30 horas, 37°C, 5% CO2) y Reaccionados(ER) inducidos con progesterona 20µM. Las muestras fijadas con acetona a 4°C se procesaron para inmunofluorescencia. Se coincubaron complejos cúmulo-ovocitos con EC pretratados con anti-SPAM1 a 37°C. Se observó su actividad hialuronidasa (0,15,30,60 min) y la unión a la zona pelúcida. Los controles no fueron expuestos al anti-SPAM1. Las fracciones NC y EC mostraron una señal en la región acrosomal, a diferencia de ER. En los ensayos de coincubación, la dispersión del cúmulo fue en función del tiempo, siendo mucho mayor en los controles. Se obtuvo una menor unión a la zona al bloquear SPAM1. Estos resultados muestran una participación de SPAM1 en la interacción, aunque no es indispensable en el proceso. Su acción enzimática es tiempo-dependiente y no representa un único mecanismo de dispersión del cúmulo. Se requiere profundizar los estudios en los componentes del complejo multimérico de reconocimiento para entender mejor cómo se establece la comunicación entre las gametas.