EFECTO DEL ZERANOL EN PARÁMETROS ESPERMÁTICOS DE CALIDAD EN Chinchilla lanigera

SUAREZ RA; IRUZUBIETA VILLAGRA AL; GRAMAJO BÜHLER MC

varias provincias

Encuentro; IV Reunión Conjunta de Sociedades de Biología de la República Argentina; 2020

todas las sociedades de biología del país

La Chinchilla es un roedor originario de Sudamérica muy apreciado por su piel y actualmente incluido en el Apéndice I del CITE, esto permite sólo la comercialización de ejemplares y de sus productos obtenidos en establecimientos habilitados. Tucumán es un foco importante de producción en el NOA y un vínculo con el comercio europeo. Para aumentar las características fenotípicas del pelaje, se popularizó en los criaderos el uso de Zeranol, para sincronizar la maduración de la piel. El Zeranol es un producto semisintético, con acción estrogénica, cuya composición corresponde a una lactona del ácido resorcílico. La administración de este compuesto bajo la forma de implantes subcutáneos permite el crecimiento integral del animal. Existen reportes de alteraciones en el tracto reproductor por su acción anabólica. En estudios anteriores demostramos alteraciones morfológicas muy marcadas en espermatozoides epididimarios con mayor incidencia en la pieza media y flagelo. El empleo de estos espermatozoides en técnicas de reproducción asistida en Chichillas representarían un importante avance biotecnológico. En este sentido, nuestro objetivo fue estudiar el efecto del Zeranol en parámetros fisiológicos de calidad (capacitación, reacción acrosómica, madurez nuclear y desnaturalización de ADN) en espermatozoides epididimarios. Se obtuvieron muestras por punción de la región caudal de 6 machos adultos (9 meses) tratados por dos meses. Las suspensiones lavadas en PBS se fraccionaron. Alícuotas fueron seleccionadas para ensayos citológicos de madurez nuclear (test de anilina-eosina) y desnaturalización de ADN (naranja de acridina). Otras fracciones fueron capacitadas en medio Fluido Tubárico Humano sintético adicionado con albúmina sérica bovina fracción V durante 2:30 horas, a 37°C en atmósfera húmeda con 5% de CO2 en aire. Para inducir la reacción acrosómica (RA) se adicionó al medio de cultivo progesterona 20µM, incubando por 45 minutos. La RA se evidenció con tinción de Coomassie Blue G250. Se analizaron 200 células por duplicado a 1000x de las fracciones incubadas. Respuesta positiva: ausencia de acrosoma, respuesta negativa: presencia de la vesícula acrosomal (banda en la región anterior de la cabeza de color azul intenso). Los resultados obtenidos muestran una conservación del material genético observando % de desnaturalización del ADN (9,6%) y madurez nuclear (79,8 %), sin diferencias significativas con muestras de animales no tratados (7% y 85% respectivamente). Los espermatozoides epididimales de animales implantados presentan un elevado % de reacción acrosómica espontánea (20%). La máxima respuesta fisiológica a la capacitación in vitro (51%) e inducción de la RA (54%) tuvieron diferencias significativas en comparación con gametas sin el efecto del Zeranol (69% y 73% respectivamente). Estos resultados muestran una alteración en las capacidades a sufrir capacitación y gatillar la RA oportunamente. Sin embargo no se registran efectos negativos en la integridad del material genético ni en la madurez nuclear. Las consecuencias potenciales en el uso de gametas obtenidas de animales expuestos a Zeranol, utilizando Inseminación Artificial, redundarían en fracasos de los programas reproductivos. Sin embargo deben profundizarse estudios para evaluar su empleo en procedimientos donde la integridad nuclear es fundamental como ICSI o PICSI en C. lanigera.