Participación de PLA2 y PLC-PI en la Reacción Acrosómica inducida con Dehidroleucodina (DhL) en espermatozoides de Chinchilla lanigera

GRAMAJO BÜHLER MC; ABDO, G; LÓPEZ, LA; SÁNCHEZ TORANZO G

San Miguel de Tucumán

Congreso; 3° Reunión Conjunta de Sociedades de Biología de la República Argentina; 2015

Sociedad de Biología de Tucumán,Soc. de Biología de Cuyo, Soc. de Biología de Córdoba y Soc. Argentina de Biología

La Dehidroleucodina (DhL) es una lactona sesquiterpénica aislada de Artemisia douglasiana Besser y pertenece a un grupo muy grande de metabolitos secundarios. Por primera vez se estudió su efecto sobre la reacción acrosómica en espermatozoides de Chinchilla lanigera demostrando su capacidad para inducir la exocitosis acrosomal. Sin embargo los mecanismos moleculares implicados en la transducción de señales aún son desconocidos. La DhL induce la exocitosis de los gránulos corticales (GC) en ovocitos de anfibio activando principalmente PLC-PI, promoviendo la formación de IP3, movilizando calcio de las reservas citosólica. En la reacción acrosómica (RA) el calcio y las fosfolipasas espermáticas tienen un rol clave en el proceso, por tal motivo, el objetivo de este trabajo es estudiar la participación de PLA2 y PLC-PI en la exocitosis acrosomal inducida con DhL en espermatozoides epididimarios de Chinchilla lanigera. Las muestras obtenidas por punción de la región caudal de epidídimos de 6 machos adultos, fueron capacitadas en THFm durante 2,30 hs en estufa con 0,5% de CO2 en aire a 37°C. Las muestras con una vitalidad superior al 75% fueron pretratadas con inhibidores de PLA2 (ATA-ácido aristocólico 320µM, Quinacrina 40µM) y PLC-PI (U73122 20µM). Se agregó al medio de incubación DhL 0,5mM como inductor de la RA. Las reacciones se pararon con formaldehido 4% (conc. Final) y glutaraldehído 2,5% y luego se procesaron empleando tinción Coomassie Blue y MEB.Las muestran pretratadas con los inhibidores de PLA2 y PLC presentaron porcentajes menores de RA en todas las concentraciones ensayadas, siendo más notorio el efecto inhibitorio (40%) de U73122. Estos resultados sugieren que la DhL induce la RA activando ambas fosfolipasas. Sin embargo la cascada de señalización activada por PLC-PI estaría comprometida en mayor medida.