Estudio in vitro de la Participación de la PKA en la Reacción Acrosómica inducida en espermatozoides Epididimarios de Chinchilla lanigera GRIS.

GRAMAJO BÜHLER MC; L. ZELARAYÁN; G.SÁNCHEZ TORANZO

Horco Molle

Jornada; XXIX Jornadas Científicas; 2012

ASOCIACIÓN DE BIOLOGÍA DE TUCUMÁN

La Chinchilla lanigera es una especie que ha cobrado interés pecuario en los últimos años. En la Argentina su cría está favorecida dentro del contexto mundial por los bajos costos de producción y el buen precio internacional de los productos finales: pieles y reproductores. Un aspecto que impacta negativamente en la producción de chinchillas es la baja tasa reproductiva en cautiverio. En este sentido el estudio de su biología reproductiva y en particular los mecanismos de transducción de señales involucrados en el proceso de reacción acrosómica (RA), es de gran importancia para evaluar los factores que afectan la función espermática. El objetivo es estudiar la participación de la proteína quinasa A (PKA) en la reacción acrosómica de espermatozoides de Chinchilla lanigera gris. MATERIALES Y METODOS: se obtuvieron muestras por punción de cola de epidídimo de ejemplares sexualmente maduros, peso promedio 650 grs., ciclos de luz-oscuridad de 12 hs a 22 ± 1°C.Los espermatozoides fueron capacitados en Fluido Tubárico humano (HTFm + albúmina). Los espermatozoides capacitados se dividieron en dos fracciones (I y II). I) Se preincubaron con diferentes concentraciones de H89, inhibidor de la PKA, durante 40 minutos y luego se agregó progesterona (20 µM) como inductor de la RA. II) Se incubaron durante 15 minutos con diferentes concentraciones de dibutiril-AMPc, activador de la PKA. Se trabajó en estufa gaseada con atmósfera de 5% de CO2 y 100% de humedad. El estado acrosomal se evaluó con tinción Papanicolaou modificada para espermatozoides. RESULTADOS: Los ensayos realizados en la fracción I muestran una disminución en los porcentajes de RA inducida de manera dosis dependiente. Mientras que en la fracción II, el aumento de la actividad de la PKA, produce un aumento de espermatozoides que sufrieron RA. CONCLUSIONES: Nuestros resultados muestran una asociación entre la reacción acrosómica y el aumento de actividad de la PKA, en espermatozoides epididimarios capacitados, sugiriendo un control del sistema AMPc/PKA donde niveles bajos de AMPc son necesarios para producir una activación de la enzima.