EL CALCIO EN LA CAPACITACIÓN DE ESPERMATOZOIDES EPIDIDIMARIOS DE Chinchilla lanigera gris

APARICIO JD; GRAMAJO BÜHLER MC

san miguel de tucumán

Jornada; XII JORNADAS CIENTÍFICAS Y ENCUENTRO DE JÓVENES INVESTIGADORES AUGUSTO E. PALAVECINO; 2011

Facultad de Bioquímica,Química y farmacia- universidad nacional de Tucumán

La Chinchilla lanígera es un roedor de gran valor pecuario, su cría intensiva está destinada al comercio de pieles y reproductores, presentando baja tasa reproductiva en cautiverio. Por tal motivo es considerada una especie en peligro de extinción y el estudio de su biología reproductiva es importante en el desarrollo de técnicas de reproducción asistida. Al igual que en el resto de los mamíferos, los espermatozoides de Chinchilla deben sufrir una serie de modificaciones a nivel bioquímico y morfológico, las cuales tienen lugar en el tracto reproductor de la hembra. Dicho proceso es llamado capacitación, y gracias a él los espermatozoides adquieren la capacidad fecundante. Esta serie de cambios son un prerrequisito para que se produzca la exocitosis acrosomal. Tanto en la capacitación como en la reacción acrosómica, el calcio es un modulador clave cuyos cambios en su concentración intraespermática son fundamentales en la transducción de señales. Objetivo Determinar la importancia del calcio intracelular y de los canales voltaje dependientes en la capacitación. Materiales y métodos Se trabajó con animales sexualmente maduros (entre 10 y 12 meses) con una masa corporal promedio de 650 g. Durante su cría fueron expuestos a ciclos de luz-oscuridad de 12 horas y mantenidos a 22 ± 1°C; además de tener libre acceso a comida y agua. Minutos después de ser faenados se extrajeron los espermatozoides por punción de la región caudal del epidídimo. La suspensión de espermatozoides lavados se dividió en dos fracciones incubándose para su capacitanción 4 horas en medio Tyrode completo y Tyrode sin calcio. De la fracción incubada en medio Tyrode completo se tomaron dos alícuotas: 1) preincubada con nifedipina (12,5 nM, 25 nM y 50 nM) durante 30 minutos y 2) preincubada con BAPTA (10 μM, 20 μM y 50 μM) durante de 30 minutos. Se empleó como agente inductor de la reacción acrosómica progesterona 20μM, incubándose 50 minutos en estufa gaseada con 5% de CO2 en aire y 100% de humedad. Se realizaron frotis de todas las fracciones ensayadas, se fijaron con etanol 96° durante 2 horas. La reacción acrosómica se evidenció con tinción de Papanicolaou modificada para espermatozoides. Conclusión El calcio intracelular es esencial para el proceso de capacitación, lo mismo que su presencia en el medio capacitante. Además se demostró la participación de canales voltaje-dependiente como vía principal de entrada para el calcio extracelular.