EMPLEO DE MELATONINA EN CRIOPRESEVACIÓN ESPERMÁTICA: ENSAYOS PRELIMINARES DEL EFECTO PROTECTOR EN GAMETAS DE Chinchilla lanigera

MEDINA MF; PUCCI ALCAIDE A; F.J. PUCCI ALCAIDE; GRAMAJO BÜHLER MC

Yerba BUena

Jornada; XL Jornadas Científicas de la Asociación de Biología de Tucumán; 2023

Asociación de Biología de Tucumán

La criopreservación de gametas es una herramienta útil en reproducción asistida animal y para ello es necesario contar con gametas aptas y el conocimiento de los mecanismos involucrados. Los espermatozoides epididimarios (EzE) de chinchilla pueden someterse a ciclos de congelación/descongelación, recuperándose gametas con buenos parámetros fisiológicos. Aun así, los daños que sufren las células por la formación de especies reactivas del oxígeno (ROS) no se han podido evitar. El agregado de antioxidantes al medio de congelación, resulta una estrategia interesante y la Melatonina ha mostrado capacidad de remover y neutralizar las ROS. El objetivo fue valorar el efecto protector de la Melatonina exógena en el medio de congelación de espermatozoides de Chinchilla lanigera. Los EzE se fraccionaron en 3 viales por duplicado: I(EzE fresco), II(EzE+Test Yolk Buffer®) y III(EzE+Test Yolk Buffer®+Melatonina 0,01µM). Los viales II y III se congelaron en nitrógeno líquido y descongelaron en baño a 37°C. Se evaluó la capacitación y reacción acrosómica (RA) con Fluido Tubárico Humano y progesterona 20µM, integridad de membrana con hos test, desnaturalización de ADN con naranja de acridina, inmunolocalización de SPAM1 con antiSPAM1+FIT C. La interacción entre gametas se valoró mediante coincubaciones con COCs y ovocitos denudados. Los EzE recuperados de los viales III mostraron mayores porcentajes (%) de vitalidad (69), integridad de membrana (64) y motilidad progresiva (52) con respecto a las congeladas sin la hormona (64, 59 y 45 respectivamente). No se registraron diferencias significativas entre las muestras II-III en capacitación, RA, desnaturalización de ADN e inmunomarcación de SPAM1. Se observó una penetración del cúmulo semejante en todas las muestras, con menor número de espermatozoides unidos a la ZP luego de un ciclo congelado/descongelado. La incorporación de Melatonina al medio de congelación de EzE resulta beneficiosa en la recuperación de células viables y mótiles, sin modificar la capacidad de inducción de la capacitación y RA. De la misma manera no aumentaron las perjurias, propias del proceso, producidas en el material genético ni en la pérdida de SPAM1. Se necesitan más estudios para incluir esta hormona en los protocolos de criopreservación.