Reservorio espermático: ensayos preliminares del efecto de un medio condicionado en la interacción oviducto-gameta

MEDINA MF; F.J. PUCCI ALCAIDE; GRAMAJO BÜHLER MC

Tafí del Valle

Jornada; XXXIX Jornadas Científicas de la Asociación de Biología de Tucumán; 2022

Asociación de Biología de Tucumán

En mamíferos, los espermatozoides depositados en el tracto reproductor femenino migran hacia el istmo formando un reservorio por adhesión al epitelio. Este depósito retrasa la capacitación y motilidad, reduce la polispermia y los mantiene vivos hasta la ovulación. El fluido y el epitelio oviductal son responsables de cambios en las gametas que permiten este proceso. El objetivo es estudiar el efecto de un Medio Condicionado (CMf) en la interacción de espermatozoides de Chinchilla lanigera y epitelio ístmico homólogo y heterólogo. Materiales y métodos. Se obtuvo CMf por incubación de oviductos de chinchilla, en medio DMEM/F12 (Gibco® [+] L-glutamina,15 mM HEPES) a 4°C por 24hs. Se aislaron istmos bovinos (Ib) y de chinchilla (Ich).Capacitación: espermatozoides epididimarios expuestos a CMf, PBS (control-) y HTFm (control+) en estufa gaseada 37°C-2:30hs. Adición de progesterona 20µM por 40 min. Valoración de estatus acrosomal con tinción Coomasie Blue.Co-incubación: los Ib/Ich se incubaron con espermatozoides en CMf, PBS y HTFm (37°C-2:30hs). Se fijaron en formaldehído bufferado a 4°C y glutaraldehído para histología y MEB. En los ensayos de capacitación, porcentajes significativamente mayores se registraron con CM y HTFm () con respecto al PBS. Las muestras co-incubadas en PBS mostraron espermatozoides en contacto/cercanos al epitelio oviductal, no así en muestras con CM y HTFm.La exposición de gametas epididimarias al CMf, evita la formación del reservorio espermático preovulatorio, en tejido homólogo y heterólogo. La falta de adhesión espermática se observa en gametas capacitadas in vitro con HTFm, infiriendo que los cambios morfo-bioquímicos que ocurren en la superficie espermática serían los responsables.