Evaluación de aspectos morfológicos y funcionales de poblaciones celulares del sistema inmune y de células asociadas al mismo, en bovinos intoxicados con Solanum glaucophyllum.

FONTANA PA; LAGUENS G; BARBEITO CG; DI GIROLAMO WMT; COSTA EF; CORONATO S; GIMENO EJ; PORTIANSKY EL.

FCV. UNLP. La Plata

Congreso; Reunion Argentina de Patologia Veterinaria; 2004

FCV. UNLP.

La calcinosis enzoótica (enteque seco) es una intoxicación crónica provocada por la ingestión de plantas calcinogénicas, tales como el Solanum glaucophyllum (duraznillo blanco). Las hojas de esta planta poseen glicósidos del 1,25 dihidroxivitamina D3 o calcitriol. En la actualidad se conocen múltiples efectos de la vitamina D, destacando su acción inmunomoduladora. En este particular, se sabe que estimula la diferenciación y actividad macrofágica e inhibe la maduración de las células dendríticas. Teniendo en cuenta que en la intoxicación con duraznillo blanco se incorporan elevadas dosis de vitamina D en el organismo, se propuso determinar su efecto sobre el sistema inmune de los animales intoxicados experimentalmente. Para ello se administraron, por vía oral, dosis de 50 g de hojas desecadas y molidas, repartidas en 2 tomas semanales, en bovinos hembras de 2 años de edad y aproximadamente 300 kg de peso corporal. Los animales fueron sacrificados de a pares a los 15 (E1515), 30 (E3030) o 60 días (E6060) a partir de la primera administración del tóxico (pi). Un par de animales fue intoxicado durante 15 días pero sacrificado a los 60 días pi (E1560). Dos animales fueron empleados como controles de intoxicación y sacrificados en el día 0 pi (C00) y en el día 60 pi (C0060). Previo a la apertura de los cadáveres, se inocularon 50 cm3 de solución fisiológica en el flanco derecho, para la extracción estéril de macrófagos peritoneales y posterior realización de pruebas de fagocitosis. A la necropsia, todos los animales intoxicados mostraron algún tipo de lesión compatible con calcificaciones. Se extrajeron los linfonodos subilíaco (prefemoral) y cervical superficial (preescapular) derechos para su procesamiento en fresco o su inclusión en parafina, respectivamente. De los linfonodos subilíacos frescos se aislaron células dendríticas, mediante métodos convencionales, sobre las que se aplicó una técnica inmunohistoquímica para la detección de la proteína S-100. Mediante análisis digital de imágenes se determinó la cantidad de células inmunomarcadas. Las muestras incluidas en parafina fueron coloreadas con H y E, observando que en los animales intoxicados se reducía el área cortical y el número relativo de poblaciones celulares del sistema inmune y aquellas células relacionadas con el mismo, por unidad de superficie. Además, se observó dilatación de los senos medulares. En los bovinos E1515 se observó la imagen de cielo estrellado, correspondiente a la presencia de macrófagos vacuolados. En los animales E3030 se observaron linfonódulos en la paracorteza. En los bovinos E6060 se observó una expansión del manto de los linfonódulos. En los bovinos E1560 se observó una hipertrofia linfonodular con incremento de los centros germinativos, en los que se apreciaron numerosos macrófagos con cuerpos tingibles (endocitosis de cuerpos apoptóticos). Además, en estos animales se observó histiocitosis sinusal. El análisis de las células aisladas mostró una reducción progresiva de células dendríticas decayendo, a los 15 días pi, a un 60% del total encontrado en los animales control, 32% a los 30 días pi y 19% a los 60 días pi. Los animales E1560 mostraron una reducción del 60%. Esta reducción del número normal fue significativa. También se observó una disminución significativa del tamaño de estas células en todos los animales intoxicados. La actividad fagocítica de los macrófagos peritoneales también disminuyó progresivamente en los animales intoxicados. En los bovinos E1560 los valores fueron semejantes a los observados en los E1515. Los resultados del presente trabajo demuestran que la intoxicación con S. glaucophylum genera alteraciones estructurales y funcionales del sistema inmune y de las células relacionadas con el mismo. La reducción en el número de células dendríticas coincide con los resultados de trabajos referentes a los efectos de la vitamina D. Sin embargo, el descenso de la actividad fagocítica de los macrófagos difiere de los resultados encontrados en la literatura, sugiriendo que el efecto de esta sustancia, a dosis tóxicas, puede ser opuesto del hallado a dosis no tóxicas.