Metástasis y angiogénesis en carcinomas mamarios en perras. Estudio histológico e inmunohistoquímico.

DIESSLER ME; PORTIANSKY EL; IDIART JR.

Esperanza. Santa Fe.

Congreso; V RAPAVE. Reunion Argentina de Patologia Veterinaria; 2006

Los carcinomas mamarios (CM) desarrollan, generalmente, metástasis en los linfonódulos regionales (LN). El comportamiento de estos tumores puede predecirse además, por el tipo histológico (TH), (estudiado exhaustivamente), el grado histológico (GH) y la presencia de émbolos neoplásicos peritumorales (ENP) (actualmente en estudio). La detección de los factores de crecimiento de los endotelios vasculares (VEGF), moléculas involucradas en la angiogénesis, y de sus receptores, es también útil para el pronóstico y el tratamiento de los CM. El objetivo del presente trabajo fue establecer la relación entre TH, GH, ENP y actividad angiogénica (estimada por un receptor de VEGF) con el hallazgo de micrometástasis evidentes u ocultas (MMO) en los LN regionales. Se recopilaron los 121 CM invasivos con sus LN remitidos al Instituto de Patología desde 1980. Se consignaron los siguientes parámetros: TH, GH (I, II o III) y ENP. De los LN sin células carcinomatosas visibles, se realizaron cuatro nuevos cortes, con una separación de 100 µm entre cada uno. Se expresaron los resultados en términos de LN+ (presencia de células carcinomatosas) o LN- (ausencia de células carcinomatosas). Las MMO fueron inmunomarcadas con un anticuerpo anti-citoqueratinas (AE1-AE3, DakoCytomation) utilizando la técnica indirecta de la peroxidasa, sistema de detección LSAB2 (LSAB2 System HRP, DakoCytomation). Se seleccionaron 20 CM, sin considerar TH ni GH (10 con LN+ y 10 con LN-) y se inmunomarcaron con el anticuerpo anti-VEGF2r (Flk-1, Santa Cruz) mediante el mismo procedimiento. De cada una de las muestras se tomaron 20 campos mediante el uso de una cámara digital (EvolutionVF, Qimaging) montada sobre un microscopio (Olympus BX50) y conectada a una computadora. Las imágenes tuvieron una resolución de 640x480 px, RGB y formato TIF, con una relación de 0.32 µm/px. Mediante el programa de análisis ImagePro Plus, v6.0 (Media Cybernetics) se analizaron los siguientes parámetros de cada imagen: porcentaje de área inmunomarcada (AIM), densidad óptica promedio (DO) y densidad óptica integrada (DOI)/mm2. Se realizaron las pruebas estadísticas de chi-cuadrado (simple y estratificado) y Fisher para las variables cualitativas y la prueba de t de Student para la expresión de Flk-1, con intervalo de confianza de 95%. Veinticinco CM fueron complejas, 59 simples, 33 mixtas y 4 carcinomas de células escamosas (CCE). Diecisisete CM fueron GH-I, 38 GH-II y 66 GH-III y 36 presentaban ENP. Se observó inmunomarcación tanto en células endoteliales como en células carcinomatosas y del tejido mesenquimático. Para los tumores LN+ los valores fueron DO: 0,063, DOI: 797,8, AIM: 31,97% y para aquellos LN- DO: 0,073, DOI: 260, AIM: 10,6%. Se encontraron diferencias significativas en el estado de los LN entre neoplasias con o sin ENP y entre CM complejos y CCE vs simples y mixtos, pero no entre estos dos últimos, ni entre los diversos carcinomas simples. Con respecto a los ENP, no se hallaron diferencias entre CM simples y mixtos, ni entre los simples, aunque las mismas fueron detectadas entre CM simples de distinto grado. Los CM complejos rara vez presentaron émbolos. En las CM mixtas sin émbolos se encontraron LN+ en un número de casos significativamente mayor al de CM simples sin émbolos. Por el contrario, cuando ambos TH presentaron émbolos, no se detectaron diferencias significativas, aunque sí se registraron diferencias en función del GH que tuvieran. Comparando los CM mixtos con y sin ENP, no se hallaron diferencias en los LN. Considerando neoplasias sin émbolos, no se hallaron diferencias entre los GH. Las neoplasias de GH-III con ENP presentaron un aumento significativo de metástasis con respecto de aquellos sin ENP, independientemente del TH. La DO de las células inmunohistoquímicamente marcadas fue similar en ambas poblaciones (LN+/LN-) (p>0,05), pero el AIM y la DOI fueron significativamente mayores (p<0,005) en neoplasias con LN+, como consecuencia del mayor número de células Flk-1+. Entre los parámetros histológicos en ausencia de ENP, el tipo histológico determina el pronóstico en mayor medida que el grado. Es menos probable encontrar ENP en un CM mixto que en uno simple. Para determinar la probabilidad de que en un CM simple hayan ENP no detectados, el grado histológico tiene mayor relevancia que el subtipo de carcinoma simple del que se trate. En presencia de émbolos, el TH no es relevante para predecir la metástasis en el LN, pero sí lo es el grado. La actividad angiogénica, parcialmente estimada en este estudio, podría tomarse como indicador del eventual hallazgo de metástasis. Ya que actualmente los LN son remitidos para el estudio histopatológico, sólo en una  proporción baja de los casos, resulta de interés conocer en qué medida las características histológicas de la neoformación pueden ser de utilidad para formular el pronóstico de la enfermedad