UNA NUEVA NAD(P)H DESHIDROGENASA DE XANTHOMONAS CITRI SUBSP. CITRI INVOLUCRADA EN LA TOLERANCIA AL ESTRÉS SALINO Y OXIDATIVO

BARCAROLO, M.V.; GARAVAGLIA, B.S.; GOTTIG, N.; JORGELINA OTTADO

Congreso; XIV SAMIGE; 2019

Introducción y Objetivos: Xanthomonas citri subsp. citri (Xcc) es el agente causal de la cancrosis de loscítricos, enfermedad mundial que afecta a variedades cítricas provocándoles una disminución en la producción ycalidad de los frutos. Durante el ciclo de vida de Xcc como epífita sobre la superficie del tejido vegetal, estáexpuesta a condiciones ambientales desfavorables entre ellas, baja disponibilidad de agua y estrés osmótico. En un estudio de proteómica realizado previamente evaluamos la adaptación de Xcc en condiciones de estréssalino generado por NaCl 0,25 M. Una proteína homóloga a una NAD(P)H deshidrogenasa (DH), presentó unaabundancia de 30 veces en bacterias sometidas a estrés salino. El objetivo de este trabajo consiste en dilucidarla función de la proteína DH en la interacción planta-patógeno y en la adaptación de Xcc en condiciones deestrés salino y oxidativo.Materiales y Métodos: Mediante qRT-PCR evaluamos los niveles de expresión de la DH y, para caracterizar lafuncionalidad de esta proteína generamos una mutante, XccDH- por doble evento de recombinación y secomplementó conjugando pBBR1MCS-2:DH, XccDH-c. A través de curvas de crecimiento evaluamos elcomportamiento de las bacterias en NaCl 0; 0,25 y 0,5 M. Para analizar la participación de la DH en latolerancia a estrés oxidativo, incubamos las bacterias en H202 25 mM. La acumulación de especies reactivas deloxígeno (ROS) en los extractos bacterianos luego del tratamiento con H202 25 mM, NaCl 0,25 y 0,5 M, secuantificaron utilizando la sonda fluorescente diacetato 2‟,7‟-diclorodihidrofluoresceína (H2DCFDA) y mediante elensayo de ?sustancias reactivas al ácido tiobarbitúrico? (TBARS).Resultados: Al evaluar los niveles de expresión de la DH en NaCl 0,25 M observamos una inducción de 3.3veces (p