CLONADO Y CARACTERIZACIÓN DE UN PEPTIDO NATRIURETICO DE PLANTAS CITRICAS

FICARRA, F.A.; GARAVAGLIA, B.S.; ZIMARO, T.; GAROFALO, C.G.; GOTTIG, N.; JORGELINA OTTADO

Rosario

Congreso; XII Congreso y XXX Reunión Anual de la Sociedad de Biología de Rosario; 2010

Los péptidos natriuréticos (NP) son una clase de hormonas peptídicas involucradas en la regulación de la homeostasis en animales. En plantas, estos péptidos presentan actividades biológicas análogas, modulando la homeostasis celular. En Arabidopsis thaliana, se han encontrado dos genes que codifican para proteínas con actividad de tipo NP, AtPNP-A y AtPNP-B. Estos genes y sus ortólogos en otras especies de plantas comparten dominios con las expansinas de pared celular. Previamente hemos estudiado el rol de un NP tipo planta presente en Xanthomonas axonopodis pv. citri (Xac), la bacteria responsable de la cancrosis de los cítricos, en el desarrollo de la enfermedad. Con el objetivo de identificar genes con similitud a AtPNP-A en la planta hospedadora de Xac (Citrus sinensis), hemos realizado una búsqueda y encontrado dos genes homólogos a AtPNP-A que hemos denominado CsPNP-A y CsPNP-B. A fin de estudiar estos péptidos, se extrajo ARN de hojas de naranja y se amplificó el cDNA de CsPNP-A. La secuencia de CsPNP-A revela que la misma posee los residuos responsables de la actividad biológica presentes en AtPNP-A y posee una secuencia hacia el extremo N-terminal que codifica para un péptido tránsito que dirige la proteína al espacio extracelular. Asimismo, hemos clonado este gen en un vector de expresión en Escherichia coli que permite la purificación en columnas de afinidad y la proteína ha sido purificada a homogeneidad. Estudios previos de nuestro grupo muestran que los NPs son capaces de mejorar la eficiencia fotosintética del tejido vegetal. Con el objetivo de verificar si CsPNP-A posee esta propiedad, se evaluó el parámetro de la eficiencia cuántica efectiva del fotosistema II (PSII) y se observó un 20 % de aumento en la eficiencia fotosintética con respecto al control. Por lo tanto podemos concluir que CsPNP-A, al igual que otros NPs de plantas, es capaz de mejorar la eficiencia fotosintética del tejido vegetal.