PRUEBAS IN VITRO DE TOXICIDAD REPRODUCTIVA (SERVICIO STAN CONICET)

NIKOLOFF N; CARRANZA A; FARNETANO, NICOLÁS; FURNUS, C.C.

Taller; 3° Taller de Métodos Alternativos al Uso de Animales para Estudios Toxicológicos de Productos Fitosanitarios con Fines Regulatorios; 2021

Debido a la complejidad del ciclo reproductivo de los mamíferos, es evidente que cualquier estrategia de prueba de toxicidad reproductiva in vitro requerirá una batería de ensayos. Se ha demostrado que procesos que ocurren durante la maduración del ovocito y la fertilización pueden ser bloqueados o alterados por químicos o compuestos farmacológicos dando como resultado un ciclo infértil o embarazo anormal. El objetivo de este servicio es revelar impactos a nivel reproductivo de productos químicos (agroquímicos, cosméticos, aditivos alimentarios, medicamentos, etc.) y materiales biomédicos utilizados en reproducción asistida (poliestireno, polipropileno, etc.) empleando la producción in vitro de embriones bovinos como modelo de estudio. El bovino tiene gran similitud con el humano en cuanto a procesos reproductivos y la biotecnología reproductiva en esta especie está bien desarrollada. Los ovocitos son obtenidos de ovarios de frigorífico y los espermatozoides de bancos de semen, aplicando el principio de las 3R. El servicio se basa en las siguientes pruebas validadas científicamente, alternativas al TG 414 OCDE: (I) Prueba de maduración in vitro (MIV) (Protocolo n° 129 (ECVAM)), permite detectar un efecto tóxico sobre el proceso de gametogénesis femenina; (II) Prueba de fertilización in vitro (FIV), permite evaluar el efecto tóxico sobre la interacción ovocito-espermatozoide; (III) Prueba de desarrollo embrionario (CIV), permite evaluar el efecto tóxico en el desarrollo del embrión hasta la etapa de blastocisto eclosionado, imitando el inicio del desarrollo del embrión hasta la implantación; (IV) Prueba de citotoxicidad (MTT) en células del cúmulus de bovino, permite evaluar efectos tóxicos sobre la proliferación y viabilidad celular. Si bien, en muchas áreas hay aceptados y validados varios métodos alternativos, no es así en el área reproductiva. Por tanto, por razones económicas como éticas, existe una gran demanda de nuevos ensayos alternativos en este campo.