OPTIMIZACIÓN DE INMOVILIZACIÓN DE BACTERIAS LÁCTICAS VAGINALES BENÉFICAS (BLVB) EN NANOFIBRAS POLIMÉRICAS Y SU INOCUIDAD POR ADMINISTRACIÓN INTRAVAGINAL EN MODELO EXPERIMENTAL MURINO

SILVA, JESSICA ALEJANDRA; DE GREGORIO PRISCILLA ROMINA; MARÍA ELENA FÁTIMA NADER-MACÍAS

Congreso; LII REUNION ANUAL y PRIMER CONGRESO VIRTUAL DE LA ASOCIACION ARGENTINA DE FARMACOLOGIA EXPERIMENTAL; 2020

El diseño de productos probióticos para el tracto urogenital femenino requiere un alto número de bacterias viables luego de su elaboración y almacenamiento, y que no produzcan efectos adversos en el hospedador. En trabajos previos se inmovilizaron BLVB en nanofibras poliméricas por electrospinning para incluir en el diseño de productos vaginales. El objetivo de este trabajo es optimizar las condiciones para mantener BLVB-nanofibras viables post-inmobilización y durante su almacenamiento, de manera comparativa con la liofilización. Asimismo, evaluar su inocuidad por administración intravaginal (i.va) en modelo experimental murino. Las BLVB se inmovilizaron con bioprotectores (leche descremada-lactosa y glicerol) y almacenaron en envases libre de oxígeno. L. rhamnosus CRL1332 se cuantificó pre y post proceso y en almacenamiento por métodos estándar en todas las condiciones. La inocuidad se evaluó en ratones hembras BALB/c (7 semanas, estrogenizados), inoculando diariamente las nanofibras (N) i.va. con y sin lactobacilos por 7 días. Se tomaron muestras de lavados vaginales (l.v.) y se sacrificaron los animales en el día 7 para extirpar vagina. En l.v. y cortes histológicos (teñidos con Giemsa y Hematoxilina-Eosina, respectivamente) se evaluaron modificaciones célulares y estructurales de vagina. Los microorganismos cultivables se cuantificaron en l.v. antes y después de la inoculación en medio de cultivo selectivo agarizado. Se aplicó también microscopía electrónica de barrido para evaluar la ultraestructura de vagina y presencia de microorganismos. L. rhamnosus CRL1332 se mantuvo viable en nanofibras en 1×108 UFC/g (similar a liofilizado) almacenadas a 4°C en envases sin oxígeno y sin bioprotectores hasta 360 días. La administración de L. rhamnosus CRL1332 inmovilizados en nanofibras no modificó la microbiota vaginal murina, incrementó los lactobacilos cultivables, sin respuesta inflamatoria o efectos adversos a nivel citológico e histológico. Se observaron bacilos en la superficie de las células epiteliales vaginales sin cambios en la ultraestructura en microscopio electrónico de barrido. Los resultados muestran un sistema novedoso de nanodelivery de L. rhamnosus CRL1332 inmovilizado en nanofibras, con larga vida útil almacenadas a bajas temperaturas. La combinación lactobacilo+nanofibras-PVA es seguro e inocuo para su inclusión en productos probióticos de aplicación vaginal.