APLICACIÓN DE LA MICROSCOPIA ELECTRÓNICA AL ESTUDIO DE LA RUGOSIDAD DE UN BIOCATALIZADOR COMERCIAL

MARIELA THEILLER; LAURA E. BRIAND; MARIA VICTORIA TOLEDO

San Carlos de Bariloche

Congreso; IV Congreso de la Asociación Argentina de Microscopia; 2016

SAMIC

Desde hace varios años, nuestro grupo de investigación utiliza el biocatalizador comercial Novozym® 435 en la esterificación enantioselectiva de fármacos como el S/R-ibuprofeno y S/R-ketoprofeno a los fines de obtener el enantiómero con actividad farmacológica. Este catalizador está compuesto por esferas de una resina macroporosa de polimetilmetacrilato sobre las que se encuentra la lipasa B de Candida antarctica (CALB) inmovilizada físicamente. En el proceso de esterificación enantioselectiva, el profeno racémico reacciona con un alcohol en presencia del biocatalizador para producir el éster del enantiómero R(-) y agua, lo cual permite la separación del S(+)-enantiómero [1, 2]. Los alcoholes de cadena corta tales como metanol, etanol, 1 y 2-propanol utilizados en la esterificación difunden en el interior de las esferas del biocatalizador provocando la disgregación-disolución del polimetilmetacrilato que constituye el soporte de la enzima CALB. Este fenómeno produce la desorción de la enzima y además, modifica la estructura interna de las esferas de biocatalizador.En este contexto, se utilizó la microscopía electrónica de barrido y el posterior análisis de las imágenes para caracterizar la textura interna del biocatalizador y obtener más evidencias de ese fenómeno. Las esferas de Novozym® 435 se embebieron en resina y luego se seccionaron en finas láminas con un micrótomo. Estos cortes se analizaron en un microscopio electrónico de barrido ambiental ESEM FEI Quanta 400 en modalidad alto vacío y con una magnificación x20000