Mecanismos de la guia axonal mediada por EphA3.

ORTALLI AL; CAFFULLI M; CARRI NG; RAPACIOLI M,; SANCHEZ V; FLORES V; PASQUALE EB; SCICOLONE G

Los Cocos, Cordoba.

Congreso; XXI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigacion en Neurociencias (SAN); 2006

Sociedad Argentina de Investigacion en Neurociencias (SAN)

Mecanismos del efecto estimulador del EphA3 sobre la guia axonal. Ana L Ortalli1, Marcela Caffulli1, Néstor G Carri2, Melina Rapacioli3, Viviana Sanchez1, Vladimir Flores3, Elena B Pasquale4, Gabriel Scicolone1. 1. Inst Biol Celular y Neurociencias. Facultad Medicina. UBA; 2. IMBICE. La Plata; 3. Universidad Favaloro; 4. Instituto Burnham, USA.. En el sistema retinotectal los axones de las CGR nasal establecen sinapsis con la región caudal del tectum y los axones de las CGR temporal contactan con el tectum rostral. Los receptores tirosinquinasa Eph y sus ligandos, las ephrinas (proteinas de membrana), participan en el establecimiento de estas conexiones. Estas moléculas se expresan en gradientes opuestos a lo largo de los ejes antoro-posterior de la retina y del tectum. Las ephrinas-A del tectum caudal repelen a los axones de las CGR temporal al activar sus receptores EphA. Previamente demostramos que el ectodominio del EphA3 (se expresa en el tectum rostral) estimula el crecimiento axonal de las CGR, pudiendo constituir la fuerza que los guia hacia el extremo caudal del tectum. Los objetivos de este trabajo son demostrar que el efecto estimulador de EphA3 depende de su concentración y de su grado de agregación  y determinar que ephrina-A es el receptor axonal candidato que media este efecto. Se realizaron cultivos de explantos de retina nasal y temporal de embriones de pollo de 7 días de desarrollo embrionario: 1) sobre sustratos con EphA3Fc o Fc a distintas concentraciones, 2) estimulados con distintos niveles de agregación de EphA3FC o Fc solubles y 3) se evaluaron los niveles de expresión de las ephrinas-A axonales mediante inmunocitoquímica.  Los resultados mostraron que: 1) EphA3 como sustrato estimula el crecimiento axonal en forma concentración dependiente presentando curvas de respuesta específicas para los axones nasales y temporales. 2) El EphA3 soluble reproduce el efecto como sustrato a partir de un nivel crítico de agregación que es específico para los axones nasales y temporales. 3) Se observa una escasa expresión axonal de ephrina-A5 mientras que la ephrina-A6 si bien se expresa en un gradiente decreciente naso-temporal presenta altos niveles en los conos de crecimiento de ambos sectores retineanos. Estos resultados sugieren puede constituir la fuerza que estimula el crecimiento de las fibras ópticas hacia el tectum caudal, que este efecto puede atribuirse a su expresión en forma de gradiente, que deben presentar un nivel de agregación mínimo sobre las células tectales para estimular el crecimiento axonal, que este efecto es diferencial sobre los axones nasales y temporales y que la ephrina-A6 axonal.es el principal candidato a mediar estos efectos. Este trabajo fue realizado con fondos del CONICET y la UBA.