Toxicidad del Bisfenol-A en embriones de anfibio. Evaluación de la toxicidad estadio-dependiente y por exposición continua durante su desarrollo

HUTLER WOLKOWICZ I., HERKOVITS, J. Y PÉREZ-COLL, C S.

Mar del Plata, Argentina

Congreso; II Congreso SETAC Argentina;; 2008

SETAC Argentina

·        . ·         El bisfenol A (BPA) ha cobrado repercusión últimamente a causa de sus efectos cancerígenos a largo plazo en humanos, derivados de su disolución a partir de utensilios para alimentos. Los estudios del BPA en organismos de vida silvestre, por ejemplo en anfibios, están focalizados solamente a sus efectos crónicos, no existiendo información aguda y teratogénica. El objetivo de este trabajo fue evaluar una eventual susceptibilidad estadio-dependiente al BPA y compararla con la exposición continua (aguda y crónica corta) a partir del estadio de blástula temprana de Rhinella (Bufo) arenarum. Se expusieron grupos de 10 embriones (por triplicado) al BPA i) a partir de 7 estadios (E.) en concentraciones entre 5 y 40 mg.L-1, durante 24 horas, luego de lo cual se lavaron exhaustivamente con solución fisiológica (SA) y se registraron diariamente los efectos letales y subletales. Se construyeron las curvas de sobrevida y los perfiles de toxicidad (curvas TOP) en base a probits, ii) a partir de blástula temprana hasta finalizar el desarrollo (E.25, 168 hs) con cambios de solución cada 48 hs y iii) a partir de E.25 por 168 hs. En cuanto a los tratamientos por estadio, se detectó una susceptibilidad diferencial, siendo los E. más sensibles, el inicio del desarrollo (blástula) y el final del mismo (E. 25) y los más resistentes, gástrula>néurula>respuesta muscular. Para los estadios más resistentes, los valores NOEC (CL10) entre las 24 y 168 hs se situaron entre 18 y 25 mg.L-1. Las CL50 para los mismos tiempos estuvieron comprendidas entre 21 y 30 mg.L-1y las CL90 entre 28 y 36 mg.L-1. Para los estadios más susceptibles las NOEC, CL50 y CL90 no variaron significativamente entre el período agudo y crónico-corto siendo de 7, 10 y 14 mg.L-1 respectivamente. Para el tratamiento continuo, los valores de CL10, 50 y 90 a las 24 hs fueron de 15, 18 y 22 mg.L-1 respectivamente, mientras que a las 168 hs (coincidente con la finalización del desarrollo embrionario) los mismos parámetros fueron de 5, 14 y 15 mg.L-1 Para el tratamiento por 168 hs a partir de E.25, los NOEC, CL50 y CL90 no variaron significativamente entre las 24 y 168 hs siendo aproximadamente de 7, 10 y 12 mg.L-1 respectivamente. Entre los efectos subletales se observaron malformaciones, retraso en el desarrollo, tapón vitelino persistente, edemas, incurvaciones, microcefalia, agenesia o subdesarrollo branquial, formación de tumores epidérmicos y alteraciones en el comportamiento. Se observó una susceptibilidad diferencial al BPA en los embriones de R. arenarum con respecto a la mortalidad y a la morfogénesis con mayor susceptibilidad al comienzo y al final del desarrollo y menor en el período intermedio entre la neurulación y el período organogenético temprano. Comparando a igual tiempo de exposición (168 hs) desde el inicio del desarrollo o desde el final del mismo (E.25) la sensibilidad del embrión es similar. Palabras clave: Bioensayos de toxicidad, Bisfenol A, embriones/larvas,  anfibios. ·         El bisfenol A (BPA) ha cobrado repercusión últimamente a causa de sus efectos cancerígenos a largo plazo en humanos, derivados de su disolución a partir de utensilios para alimentos. Los estudios del BPA en organismos de vida silvestre, por ejemplo en anfibios, están focalizados solamente a sus efectos crónicos, no existiendo información aguda y teratogénica. El objetivo de este trabajo fue evaluar una eventual susceptibilidad estadio-dependiente al BPA y compararla con la exposición continua (aguda y crónica corta) a partir del estadio de blástula temprana de Rhinella (Bufo) arenarum. Se expusieron grupos de 10 embriones (por triplicado) al BPA i) a partir de 7 estadios (E.) en concentraciones entre 5 y 40 mg.L-1, durante 24 horas, luego de lo cual se lavaron exhaustivamente con solución fisiológica (SA) y se registraron diariamente los efectos letales y subletales. Se construyeron las curvas de sobrevida y los perfiles de toxicidad (curvas TOP) en base a probits, ii) a partir de blástula temprana hasta finalizar el desarrollo (E.25, 168 hs) con cambios de solución cada 48 hs y iii) a partir de E.25 por 168 hs. En cuanto a los tratamientos por estadio, se detectó una susceptibilidad diferencial, siendo los E. más sensibles, el inicio del desarrollo (blástula) y el final del mismo (E. 25) y los más resistentes, gástrula>néurula>respuesta muscular. Para los estadios más resistentes, los valores NOEC (CL10) entre las 24 y 168 hs se situaron entre 18 y 25 mg.L-1. Las CL50 para los mismos tiempos estuvieron comprendidas entre 21 y 30 mg.L-1y las CL90 entre 28 y 36 mg.L-1. Para los estadios más susceptibles las NOEC, CL50 y CL90 no variaron significativamente entre el período agudo y crónico-corto siendo de 7, 10 y 14 mg.L-1 respectivamente. Para el tratamiento continuo, los valores de CL10, 50 y 90 a las 24 hs fueron de 15, 18 y 22 mg.L-1 respectivamente, mientras que a las 168 hs (coincidente con la finalización del desarrollo embrionario) los mismos parámetros fueron de 5, 14 y 15 mg.L-1 Para el tratamiento por 168 hs a partir de E.25, los NOEC, CL50 y CL90 no variaron significativamente entre las 24 y 168 hs siendo aproximadamente de 7, 10 y 12 mg.L-1 respectivamente. Entre los efectos subletales se observaron malformaciones, retraso en el desarrollo, tapón vitelino persistente, edemas, incurvaciones, microcefalia, agenesia o subdesarrollo branquial, formación de tumores epidérmicos y alteraciones en el comportamiento. Se observó una susceptibilidad diferencial al BPA en los embriones de R. arenarum con respecto a la mortalidad y a la morfogénesis con mayor susceptibilidad al comienzo y al final del desarrollo y menor en el período intermedio entre la neurulación y el período organogenético temprano. Comparando a igual tiempo de exposición (168 hs) desde el inicio del desarrollo o desde el final del mismo (E.25) la sensibilidad del embrión es similar. Palabras clave: Bioensayos de toxicidad, Bisfenol A, embriones/larvas,  anfibios.