El mayor daño miocárdico producido por aumento del secuestro de calcio en ratones con fosforilación del RyR2 dependiente de CaMKII, no es debido a un mayor gasto energético

VALVERDE CA; RAGONE I; DI CARLO MN; MATTIAZZI A; CONSOLINI A

La Plata

Congreso; Reunión Anual SAFIS 2016; 2014

Sociedad Argentina de Fisiología

En experimentos previos demostramos que en ratones mutantesSDKO, resultantes de la cruza de animales con seudofosforilación constitutivadel receptor de rianodina cardíaco (RyR2) por CaMKII, (mutación S2814D, conaumento de la pérdida de calcio (Ca2+) del RS y predisposición aarritmias), y animales con ablación genética de PLN (PLNKO, con aumento delsecuestro de Ca2+), se previnieron las arritmias observadas en losS2814D. En los ratones SDKO, sin embargo, la ablación de PLN no fue capaz deprevenir, sino que exacerbó, el daño miocárdico (infarto), causado por isquemiay reperfusión (I/R) en los S2814D. El mecanismo de este efecto dual del aumentodel secuestro de Ca2+, beneficioso en las arritmias pero perjudicialen el infarto, podría deberse a diferentes causas, entre ellas: 1?La ablaciónde PLN en los SDKO aumenta el gasto energético; 2-La ablación de PLN en losSDKO exagera la pérdida de Ca2+ de los S2814D, hecho que a su vezpuede exacerbar el daño mitocondrial y la muerte celular. Nuestro  objetivo fue estudiar la primera posibilidad.Para ello se realizaron experimentos de I/R (20/30min) en corazones (perfusión isovolúmicatipo Langendorff), de ratones S2814D, SDKO y PLNKO. La combinación de ambasmutaciones en los corazones SDKO exacerbó significativamente el daño miocárdicono sólo con respecto a los S2814D sino también respecto a los PLNKO: tamañoinfarto en porcentaje del área de riesgo y actividad de LDH medida en UI/g enel efluente de perfusión, respectivamente: S2814D: 7,4±2,0 y 226,0±45,5, PLNKO:18,9±2,2 y 246,5±30,5 y SDKO 23,4±3,6 y 399,1±55,0. Comparamos entonces elgasto energético de corazones de ratones PLNKO y SDKO (ambos con ablación dePLN) medido como flujo de calor total (Ht) en un calorímetro de flujo a 37°C.El Ht fue mayor en PLNKO vs. SDKO al comienzo de la reperfusión (46,5±10,4 vs. 29,2±3,0 mW/g) para luego converger a valores similares al final de la misma.Concluimos que el incremento del daño miocárdico producido por la ablación dePLN en los SDKO no es debido a un mayor gasto energético, ya que los PLNKO conmayor gasto postisquémico (compatible con remoción de Ca2+) tienenmenor daño. El aumento del infarto en los SDKO podría atribuirse a la mayorpérdida de Ca2+ por el RyR2 (presumiblemente hacia la mitocondria), inducidapor la doble condición de aumento del secuestro de Ca2+ al RS yalteración en la actividad del RyR2 por fosforilación por CaMKII.