LA ANGIOTENSINA II PROMUEVE LA MUERTE CELULAR EN MIOCITOS AISLADOS DE RATA POR UN MECANISMO CA2+-INDEPENDIENTE QUE REQUIERE UN AUMENTO DE RADICALES LIBRES, ACTIVACIÓN DE CAMKII Y P38 MAPK.

SAPIA L; VALVERDE CA; VILA-PETROFF M

Mar del Plata

Congreso; LV Reunion de la Sociedad Argentina de Fisiologia; 2007

Sociedad Argentina de Fisiologia

La muerte celular contribuye a la progresi¨®n de la insuficiencia cardiaca (IC). El aumento de la Ang II circulante ha sido propuesto como uno de los principales determinantes de la evoluci¨®n de la IC en parte debido a que promueve la muerte celular. Aunque un aumento de Ca2+ ha sido sugerido como el principal efector de muerte celular inducida por el p¨¦ptido, la Ang II activa otros mensajeros alternativos, independientes del Ca2+ que podr¨ªan potencialmente ser inductores de apoptosis/necrosis. Entre ellos, los radicales libres (ROS), la p38 MAPK y la CaMKII han sido identificados como mol¨¦culas inductoras de muerte celular. En este estudio, utilizando miocitos de rata cultivados durante 24 hs, evaluamos si la muerte celular inducida por Ang II se asocia con un aumento del Ca2+i y/o de radicales libres y si esta depende de la activaci¨®n de CaMKII y p38 MAPK. La incubaci¨®n de las c¨¦lulas con 1¦ÌM de Ang II disminuy¨® significativamente la viabilidad celular determinada morfom¨¦tricamente, de 69,9 ¡À 3,2% a 40,8 ¡À 4,3% (n=6), a expensas de un aumento de la apoptosis evaluada por la activaci¨®n de caspasa 3 y tinci¨®n TUNEL y necrosis determinada por liberaci¨®n del LDH. El tratamiento con Ang II no modific¨® el Ca2+i (Indo-1) pero aument¨® significativamente la producci¨®n de ROS (DFC-DA) y el tratamiento con el secuestrador de ROS, MPG, previno completamente la muerte celular inducida por el p¨¦ptido. En experimentos paralelos, la muerte celular inducida por Ang II se previno con los inhibidores de la CaMKII, KN-93 (71 ¡À 4,6%; n=4) y de la p38 MAPK, SB 203580 (62,2 ¡À 2%; n=6) y la sobreexpresi¨®n de la p38 MAPK, mediante transferencia g¨¦nica adenoviral, exacerb¨® la muerte celular inducida por el p¨¦ptido (25,6 ¡À 0,9%; n=3). Estos resultados sugieren que la muerte celular inducida por la Ang II no es mediada por aumentos del Ca2+i y establece a los radicales libres como un mecanismo activador de la CaMKII y de la p38 MAPK y que culmina en la muerte celular.