INVESTIGADORES
VALVERDE Carlos Alfredo
congresos y reuniones científicas
Título:
Impacto de la fosforilacion del canal liberador de ca2+ receptor de rianodina (ryr2) del reticulo sarcoplasmatico (rs ) por la quinasa dependiente de ca2+ y calmodulina (camkii) en la injuria irreversible por isquemia y reperfusion (I/R).
Autor/es:
DI CARLO MN; SAID M; VALVERDE CA; WEHRENS XH; MATTIAZZI A; SALAS M
Lugar:
Rosario
Reunión:
Congreso; XXXI Congreso Nacional de Cardiología; 2013
Institución organizadora:
Federación Argentina de Cardiología
Resumen:
En experimentos previos demostramos que CaMKII se activa en el miocardio
al comienzo de la reperfusión y que su inhibición, produce una
disminución significativa del tamaño del infarto, necrosis y apoptosis
(Salas el al., 2010). Uno de los sustratos de CaMKII, es el residuo
serina (Ser) 2814 del RyR2. Nuestro objetivo fue evaluar si la
fosforilación de dicho sitio participaba en la injuria por I/R. Se
realizaron experimentos en ratones C57BL/6, en transgénicos con el
residuo fosforilable por CaMKII del RyR2 mutado a alanina (no
fosforilable - Ser2814A-) o a aspartato (fosforilación constitutiva
-Ser2814D-) y en sus controles (WT). Corazones aislados y perfundidos
(Langendorff) se sometieron a I/R global normotérmica (45min/120min). Se
obtuvieron parámetros mecánicos y se midió tamaño de infarto
(trifeniltetrazolio). Los C57BL/6 mostraron un aumento significativo de
la fosforilación del sitio Ser2814 del RyR2 a los 3 y 5 min de
reperfusión (210.3±41.9% y 191.1±41.0% de los valores preisquémicos,
respectivamente). Los Ser2814A presentaron una disminución significativa
del área de infarto (16.40±1.60% Ser2814A vs 32.31±4.96 % WT, n =6 /
grupo) y mayor recuperación contráctil a los 120min de reperfusión
(8.37±2.31 Ser2814A vs 2.45 ±.0.66 WT, n=7/grupo). Los Ser 2814D
mostraron igual recuperación contráctil que los WT y un mayor tamaño de
infarto, que no alcanzó niveles significativos. Este resultado podría
explicarse porque los Ser2814D presentan un menor contenido de Ca2+ del
RS (van Oort et al. Circulation, 2010). Para verificar esta hipótesis,
cruzamos ratones Ser 2814D con animales cuyo RS está sobrecargado de
calcio debido a que carecen de fosfolamban (KO), con el objeto de
obtener un animal con RS cargado de calcio y RyR2 constitutivamente
fosforilado (ratones SK). Los corazones de estos animales presentaron un
aumento significativo del tamaño del infarto y de la necrosis (LDH) y
disminución de la recuperación contráctil. Conclusión: la fosforilación
del RyR2 por CaMKII y la carga de Ca2+ del RS están involucrados en el
daño miocárdico producido por I/R.