INVESTIGADORES
RUBIO Maria Fernanda
congresos y reuniones científicas
Título:
La disminución del coactivador RAC3 en células de leucemia mieloide crónica las sensibiliza a la apoptosis inducida por TRAIL
Autor/es:
COLO GP; RUBIO MF; ALVARADO CV; COSTAS MA
Lugar:
Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina
Reunión:
Congreso; LII Reunión Científica SAIC; 2007
Institución organizadora:
SAIC
Resumen:
El coactivador de receptores nucleares RAC3 se encuentra
sobre-expresado en varios tumores y juega un rol importante en
distintos procesos biológicos. Demostramos previamente que
RAC3 se encuentra sobre-expresado en una línea leucémica
mieloide crónica (K562), la cual es resistente al tratamiento con
la citoquina de la familia de TNF, TRAIL. Por medio de la técnica
de RNA de interferencia (RNAi), disminuimos los niveles
endógenos de RAC3 en clones estables de K562 y observamos
un aumento del 71±3% de la apoptosis inducida por TRAIL a las
24 horas. En este trabajo demostramos por medio de la técnica
de citometría de flujo, usando anticuerpos específicos para los
receptores DR4 y DR5, que la disminución de RAC3 por RNAi
involucra un aumento de estos receptores. Mediante la técnica de
western blot observamos un aumento en la formación del DISC;
activación de Bid, caspasas y PARP. La activación de la vía
mitocondrial se midió con el fluorocromo DiOC6 por citometría de
flujo y observamos una perdida en el potencial de la membrana
mitocondrial del 69±2%. Mediante la técnica de western blot se
detectó un aumento en la liberación de citocromo c, AIF y Smac/
DIABLO al citoplasma en los clones estables con bajos niveles
de RAC3, comparados con células control de K562. Se determinó
la actividad de NF-kappaB por Elisa, observamos una disminución
del 48±3% en la activación de NF-kappaB, de acuerdo a
lo previamente descripto por nuestro grupo, donde RAC3 además
de ser coactivador de los receptores esteroideos, es coactivador
de NF-kappaB. Concluimos que la sobre-expresión del coactivador
RAC3 en K562, contribuye en la resistencia al tratamiento con
TRAIL de células leucémicas y su función anti-apoptótica es independiente
al rol conocido como coactivador de receptores hormonales.
RAC3 estaría contribuyendo al desarrollo tumoral y podría
se un posible blanco para futuras terapias en tumores dependientes
o no de hormonas.
