Estudio y caracterización del gen yhdO de Bacillus subtilis que codifica para una acilglicerolfosfato aciltransferasa

PAOLETTI L, SCHUJMAN GE, DE MENDOZA D

La Plata. Buenos aires. Argentina

Congreso; II Jornadas de Bioquímica y Biología Molecular de Lípidos y Lipoprotínas; 2003

INIBIOLP. Facultad de Ciencias Médicas, UNLP

El gen yhdO de B. subtilis codifica para una proteína que presenta homología a acilglicerolfosfato aciltransferasas. Estas enzimas catalizan la transferencia de ácidos grasos al acilglicerolfosfato. Debido a la poca información existente sobre la biosíntesis de fosfolípidos en este microorganismo, nos pareció importante su estudio. Para determinar la función del gen yhdO en B. subtilis se construyó la cepa LP15, que posee la única copia del gen bajo un promotor inducible por IPTG. Dicha cepa fue incapaz de crecer en ausencia del inductor, indicando que el gen es esencial en este microorganismo.  Se cultivó esta cepa en presencia de acetato marcado y se determinó el contenido lipídico. Se observó que en ausencia de yhdO, por remoción del inductor IPTG del medio de cultivo, se interrumpe la síntesis de fosfolípidos acumulándose ácidos grasos. Además la expresión de yhdO en una cepa de E. coli que no sintetiza la acilglicerolfosfato aciltransferasa (plsC-) permitió el crecimiento de la misma. La expresión de yhdO en B. subtilis se encuentra  regulada por FapR. Esta proteína es un represor que regula también la expresión de genes involucrados en la síntesis de ácidos grasos. El análisis de la composición de fosfolípidos en mutantes que no espresan el regulador mostró que dicha cepa sintetiza menor cantidad de fosfolídos, aunque se observa una acumulación de ácidos grasos y de la proteína YhdO. Con estos resultados concluimos que el gen yhdO codifica para una acilglicerolfosfato aciltransferasa y que la regulación de la biosíntesis de ácidos grasos y de fosfolípidos estaría coordinada en Bacillus subtilis.