ESTUDIO DE GENES DE BACILLUS SUBTILIS QUE CODIFICAN PARA ENZIMAS INVOLUCRADAS EN LOS PRIMEROS PASOS DE LA SÍNTESIS DE FOSFOLÍPIDOS.

PAOLETTI L, SCHUJMAN GE, DE MENDOZA D

Bahía Blanca- Argentina

Congreso; III Jornadas de Bioquímica y Biología Molecular de Lípidos y Lipoproteínas; 2005

INIBIBB- Universidad Nacional del Sur

En E. coli existen dos genes, plsB y plsC, que codifican para aciltransferasas involucradas en la catálisis de las dos primeras reacciones de síntesis de fosfolípidos. Además hay un tercer gen, plsX, cuya función es desconocida pero estaría relacionada con las actividades aciltransferasas. En B. subtilis se ha detectado la presencia de un gen homólogo a plsX y de un único gen homólogo a plsC denominado yhdO, mientras que no se ha podido hallar ningún gen con homología a plsB. Debido a la poca información existente sobre la síntesis de fosfolípidos en microorganismos Gram positivos y las diferencias que estos presentan con bacterias Gram negativas, en nuestro laboratorio comenzamos el estudio de dicha vía biosintética tomando como microorganismo modelo a B. subtilis Se analizó la ubicación subcelular de YhdO mediante western blot, fusión a GFP e inminofluorescencia, encontrándose que dicha proteína se halla homogéneamente distribuida en la membrana plasmática. Para determinar las funciones de las enzimas codificadas por yhdO y plsX se construyeron mutantes condicionales. Ambos genes resultaron ser esenciales para el crecimiento de B. subtilis. El análisis de la composición lipídica de las cepas mutantes demostró que hay un bloqueo de la síntesis de fosfolípidos cuando algunos de estos genes no se expresa. Mediante estudios de complementación de mutantes plsB plsX y plsC de E.coli se pudo concluir que YhdO posee actividad acil glicerol-3-fosfato aciltransferasa y que PlsX tendría funciones similares en ambos microorganismos y su actividad estaría relacionada directa o indirectamente en la catálisis de las reacciones de acilación del glicerolfosfato.