Implicancia de la palmitoilación en el efecto del 17beta-estradiol sobre la actividad funcional de células lactotropas

SOSA L.; GUTIÉRREZ S.; PETITI J.P.; VACA A.; DE PAUL A.L.; VALDEZ TAUBA J.; TORRES A.I.

Mar del Plata

Congreso; LVIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2013

Modificaciones post-traduccionales del receptor estrogénico alfa (REalfa) entre las que se incluyen la adición de un ácido graso (S-acilación, comúnmente denominada palmitoilación), promueven la interacción con la membrana plasmática en diferentes tipos celulares. Previamente identificamos un pool del REalfa en la membrana plasmática de células lactotropas demostrando que su expresión es incrementada por 17beta-estradiol (E2). En este trabajo nos propusimos analizar la implicancia de la palmitoilación en los efectos rápidos del E2 y genómicos en interacción con FGF2, mediados por los REalfa de membrana (REalfam). Cultivos primarios adenohipofisarios de rata Wistar hembra fueron tratados con: E2 (10nM) por 5,15, 30 min solo o co-incubados con FGF2 (10ng/ml). Además, se utilizó el inhibidor de la palmitoilación: 2bromo palmitato (2BP, 10 nM). Los efectos rápidos del E2 fueron evaluados por la cuantificación de PRL secretada y los iniciados en la membrana que desencadenan acciones genómicas, por valoración de la proliferación de lactotropas, 24hs posterior incorporación de BrdU (ICQ PRL/BrdU). El REalfam y caveolina-1(cav-1) fueron identificados por ICQ al microscopio electrónico (ME) y confocal (MC). La expresión de ERK total y fosforilada fue analizada por WB. Estadística: ANOVA-Tukey. Mediante MC el REalfa fue observado en núcleo y citoplasma de células controles y posterior al estímulo con E2 fue detectado además en la membrana plasmática colocalizando con cav-1. La interacción del REalfa y cav-1 fue confirmada por ME. La secreción de PRL incrementó luego del estímulo con E2 siendo inhibida por 2BP, la cual se correlacionó con una disminución de ERK1/2 fosforilada. La actividad mitogénica de lactotropas fue incrementada por E2/FGF2, observándose que la inhibición de la palmitoilación suprimió la proliferación y la fosforilación de ERK1/2. Estos resultados sugieren que la palmitoilación podrían regular los efectos del E2 mediados por los REαm sobre la actividad funcional de las células lactotropas.