Participación de la PKC alfa y ERK 1/2 en la proliferación de células lactotropas de rata inducidas con esteres de forbol

PETITI J.P.; DE PAUL A.L.; GUTIÉRREZ S.; MUKDSI J. H.; TORRES A.I.

Mar del Plata

Congreso; 50 Reunión Anual de la SAIC; 2005

SAIC

Las PKC involucradas en la proliferación celular constituyen un blanco atractivo en la terapia del cáncer. El objetivo de este trabajo fue determinar si las isoformas de PKC alfa, epsilon y delta están involucradas en la proliferación de lactotropas inducidas con esteres de forbol (PMA) y la posible participación de las ERK1/2.Cultivos de adenohipófisis de ratas hembras fueron tratadas con PMA (400 nM) por 15min para activar las PKC y por 5 y 8h para analizar su desregulación. Además la activación de las PKC fue bloqueada con un inhibidor específico (BIM 4uM) por 30min. La proliferación de lactotropas fue cuantificada por doble inmunomarcación para BrdU y PRL. La expresión de las PKC alfa, epsilon, delta y ERK1/2 fosforilada (P) fue determinada por western blot en extractos totales de células controles y tratadas con PMA y BIM +PMA. Los datos fueron analizados por ANOVA-Tukey.El tratamiento con PMA por 15min aumentó un 37,3% la proliferación de lactotropas (p< 0.001). Este efecto fue revertido en un 60% por acción del BIM (p< 0.05). Tratamientos prolongados con PMA (5 y 8h) disminuyeron la proliferación de lactotropas con respecto a la observada a los 15min (p< 0.001). Un comportamiento similar mostró la expresión de la PKC alfa al aumentar un 46,6% (p< 0.05) a los15min de exposición al PMA y disminuir (p< 0.01) a tiempos prolongados. Las PKC epsilon y delta no mostraron diferencias significativas en los tratamientos con PMA. Un marcado incremento (p<0.05) en la expresión de ERK1/ 2-P fue observado a los 15min con PMA, efecto bloqueado parcialmente por BIM. La correlación entre la expresión de PKC alfa y la proliferación de lactotropas inducida con PMA, indicaría la participación de esta isoforma en el proceso proliferativo. Los cambios observados en la expresión de las ERK1/2-P, demostrarían que una de las vías de transducción de señales involucradas en la proliferación de células lactotropas inducidas por PMA estaría mediada por la activación de las ERK1/2.