Efectos de lipopolisacárido bacteriano (LPS) sobre la actividad proliferativa y secretoria de células lactotropas: Rol modulador del estrógeno

ALVIN G.; GUTIÉRREZ S.; PETITI J.P.; SOSA L.; PALMERI C.; SOAJE M.; MALDONADO C. A.; TORRES A.I.; DE PAUL A.L,

Mar del Plata

Congreso; LII Reunión Anual de la SAIC; 2007

SAIC

La endotoxina de bacterias gram-negativas, LPS, se aplica para estudiar interacciones inmuno-endocrinas. Nos propusimos investigar el efecto de LPS sobre la proliferación y secreción de células lactotropas de hipófisis hiperplásicas y evaluar el rol del estrógeno (E2) en estos procesos. Ratas machos fueron tratadas con cápsulas subcutáneas de benzoato de E2 (30mg) por 60d. Estas glándulas se cultivaron aplicándose los siguientes protocolos: LPS (100ng y 2ug/ml) por 6 y 24h; E2 (100nM) por 4 y 24h; interacción LPS-E2 por 24h (Inter) y sensibilización por pre-incubación con E2 4h y posterior tratamiento con LPS por 24h (Sens). Controles (C) fueron incubados en paralelo. Se evaluó la proliferación celular por doble ICQ para BrdU/PRL y la secreción de PRL por RIA. La expresión de TLR4 y NF-kB fue determinada por western blot y su presencia, a nivel ultraestructural, se evaluó por ICQ. Análisis estadístico: ANOVA-Fisher. Ambas dosis de LPS aplicadas por 6 y 24h duplicaron el número de lactotropas (p< 0.001), en tanto que E2 aumentó un 60% (vs. C). En Inter, el incremento de la proliferación fue del 130% y en Sens se revirtió parcialmente la respuesta proliferativa de LPS (60% vs C; p< 0.001). Los niveles de PRL no se modificaron en presencia de E2 por 24h y LPS disminuyó significativamente la liberación de PRL independientemente de la presencia de E2. La expresión de TLR4 y NK-kB sólo aumentó con LPS e Inter (p< 0.05 vs C) y se mantuvo invariable frente a E2. Los niveles de NF-kB disminuyeron en Sens. Se detectó la localización de TLR4 principalmente en el citosol y NF-kB en núcleos de lactotropas. Se demuestra que las células lactotropas derivadas de hipófisis hiperplásicas poseen la capacidad de interactuar y responder de manera directa a LPS, a través de TLR4-NF-kB, desencadenando procesos celulares que promueven la proliferación e inhiben de la secreción de PRL. El estrógeno actuaría modulando la proliferación de células lactotropas inducida por LPS.