Recuperación de catalasa a partir de diferentes fuentes animales empleando sistemas bifásicos acuosos

GALANTE, M.; BELLUZO, M. S.; SPELZINI, D.; PICÓ, G.A.; BOERIS, V.

La Plata

Simposio; II Simposio argentino de Procesos Biotecnológicos; 2012

Uno de los primeros desafíos con los que se encuentra la biotecnología es aislar y purificar macromoléculas de interés a partir de una fuente natural compleja (vegetal, animal o microbiana), proceso conocido como bioseparación. El medio donde se encuentra la proteína de interés puede presentar una gran cantidad de impurezas que deben ser eliminadas y la proteína blanco suele estar en muy baja proporción respecto de la concentración total de proteínas. Los sistemas bifásicos acuosos (SBA) son sistemas de reparto que se forman a partir de dos polímeros mutuamente incompatibles solubles en agua o un polímero y una sal inorgánica. Las proteínas se reparten entre las dos fases acuosas de acuerdo a un coeficiente de reparto que se define como: K= [Ps]/[Pi], donde [Ps] y [Pi] son sus concentraciones en la fase superior (FS) e inferior (FI) respectivamente. La K depende de una serie de variables: pH, temperatura, peso molecular y concentración del polímero, hidrofobicidad de la proteína, etc. Mediante el control de esas variables puede lograrse que una proteína contenida en una mezcla compleja sea trasferida hacia una de las fases, quedando las proteínas no deseadas en la fase opuesta. La catalasa (CAT) es una enzima que cataliza la descomposición de peróxido de hidrogeno, por lo cual es utilizada en la industria alimenticia y textil para la eliminación de este producto. En este trabajo se utilizó el reparto en SBA conformados por polietilenglicol (PEG) y dos sales (tartrato y fosfato) como metodología para la recuperación de la enzima catalasa hepática a partir de dos fuentes animales: hígado bovino y murino, estudiando para tal fin la influencia de diferentes variables del proceso.