Evaluación de distintos niveles de progesterona por métodos inmunoquímicos que utilizan detección espectroscópica o electroquímica

SEVERINO, F.; BELLUZO, M. S.; LAGIER, C. M.; RIBONE, M. E.

Bahía Blanca, Argentina

Congreso; V Congreso Argentino de Química Analítica; 2009

Asociacion de quimica analitica

La producción bovina en nuestro país constituye un importante recurso económico. No obstante, los rendimientos podrían ser mejorados si fuera posible incrementar la tasa de producción animal. Un modo de conseguir esto es mediante la inseminación en el momento del estro y la detección temprana de la ingravidez, en caso de inseminación fallida, para poder entonces repetir el proceso a la brevedad posible. Para ello, es preciso contar con métodos confiables que permitan evaluar los niveles de progesterona, hormona indicativa del estado del animal.Si bien es posible adquirir en el mercado extrangero kits de ELISA convencionales para la detección de progesterona en fluídos vacunos, éstos poseen costos prohibitivos para el productor ganadero local. Por lo tanto, resulta de interés el desarrollo de un método para evaluar los niveles de progesterona que permitan la detección tanto del estro como de la preñez en ganado bovino.En los últimos años se ha avanzado en el estudio de nuevas metodologías para el análisis inmuniquímico con detección electroquímica que permiten identificar analitos de situaciones fisiológicas o patológicas de utilidad diagnóstica en muestras biológicas. Más aún, ya se ha presentado una estrategia en la que se propone la detección de la hormona utilizando electrodos estampados serigráficamente (SPE). Sin embargo, las limitaciones en la reproducibilidad y sensibilidad reportadas cuando se utilizan SPE, han impedido el desarrollo de equipos comerciales.En este trabajo se informa acerca de los resultados obtenidos durante el desarrollo de inmunoensayos que permiten detectar progesterona. En primer término, se efectuaron inmunoanálisos competitivos sobre placas  de ELISA sensibilizadas con anticuerpos monoclonales, habiendo utilizado la detección espectrofotométricaconvencional. Seestablecieron las condiciones óptimas de trabajo, realizándose la curva de calibración tanto del anticuerpo como del antígeno marcado. En una segundaetapa, se estudió la factibilidad de evaluar electroquímicamente el nivel de progesterona en muestras de leche artificialmente adicionadas de la hormona. Para ello, se ensamblaron inmunoelectrodos sobre distintos soportes y se evaluaron sus respuestas