The Na+/HCO3- co-transporter and the carbonic anhydrase contribute to myocardial reperfusion injury.

JC FANTINELLI; ,A ORLOWSKI; ALVAREZ BV; A AIELLO; SM MOSCA

Foz de Iguazú

Congreso; 1º Panamericann Congress of Physiological Sciences; 2014

El HCO3- es el principal buffer y producto primario de desecho del metabolismo celular. Las células controlan la concentración y el movimiento de HCO3- a través de la membrana plasmática, mediante la actividad de la anhidrasa carbónica (AC), el intercambiador Cl-/HCO3- (AE) y el co-transportador Na+/HCO3- (NBC). En el corazón se han descripto al menos 3 isoformas del NBC, una electroneutra (NBCn), de estequiometría 1 Na+/1 HCO3- y dos isoformas electrogénicas (NBCe), de estequiometría 1 Na+/2 HCO3-. Durante la isquemia el pH miocárdico desciende como resultado de la falla en la eliminación de ácidos originados por el metabolismo anaeróbico. En esta situación y para normalizar el pH se activa el NBC entre otros mecanismos, co-transportador que interacciona física y funcionalmente con la AC. Durante la reperfusión NBC y AC se reactivan contribuyendo a la sobrecarga de Na+ y Ca2+ siendo este último uno de los factores responsables de la injuria postisquémica. Sin embargo, la contribución de ambos transportadores en isquemia-reperfusión no está totalmente dilucidada. Por ello, el objetivo del presente estudio fue evaluar la contribución del NBC y AC al tamaño del infarto (TI) y a la función miocárdica producidos por la isquemia y la reperfusión. Corazones de ratas Wistar de 5 meses de edad se aislaron y perfundieron isovolúmicamente, los cuales después de un período de estabilización de 20 min fueron asignados a los siguientes protocolos experimentales: 1) Control no-isquémico (NI): fueron perfundidos durante 120 min; 2) Control isquémico (CI): se realizó durante 40 min la oclusión de la arteria coronaria descendente anterior y luego de liberada la oclusión se continuó la perfusión por 60 min; 3) Grupos tratados: 3a: Se administró S0859 (10 mM), inhibidor selectivo del NBC, en los primeros 10 min de la reperfusión; 3b: Se perfundió con el anticuerpo contra el bucle extracelular 3 del NBCe1 (a-L3, dilución 1/500) y 3c: se trató con benzolamida (5 mM), inhibidor de la AC. El TI se midió mediante la técnica de tinción con sales de TTC y Azul de Evans. La presión desarrollada del ventrículo izquierdo (PDVI) y la presión diastólica final (PDFVI) se utilizaron para determinar la función sistólica y diastólica, respectivamente. El tratamiento con S0859, a-L3 y benzolamida redujo significativamente el TI (19 ± 1 %, 16 ± 3% y 6 ± 0.4 % para S0859, a-L3 y benzolamida, respectivamente vs 39 ± 2 % en corazones isquémicos no tratados). La PDVI aumentó en los grupos tratados con a-L3 y benzolamida (70 ± 6 % y 80 ± 3 %, respectivamente vs 46 ± 5 % en el grupo isquémico sin tratamiento). En el grupo CI, la PDFVI aumentó significativamente alcanzando al final de la reperfusión un valor de 54 ± 4 mmHg (valor preisquémico: 11 ± 1 mmHg) mientras que en los grupos tratados dicho parámetro no se modificó con el a-L3: 12 ± 1 mmHg; benzolamida: 13 ± 1 mmHg, mientras que con S0859 fue de 46±6 mmHg. Estos datos muestran que en corazones aislados el NBC y específicamente el NBCe1, así como la AC están involucrados en la lesión irreversible y en la alteración contráctil producida por isquemia-reperfusión. El bloqueo de ambas entidades ejerce un efecto cardioprotector el cual podría ser atribuido a la disminución de la sobrecarga de Ca2+.