In vivo selection of Brucella abortus genes related with virulence

G.BRIONES, M.ROSET, A.CIOCCHINI, N.IÑON DE IANNINO AND R.UGALDE

Víña del Mar, Chile

Congreso; Reunión Iberoamericana de Bioquímica, Biología Molecular y Biología Celular; 2000

Sociedad Argentina de Investigaciones en Bioquímica y Biología Molecular (SAIB)

Brucella abortus Sl9 es una mutante bacteriana atenuada espontáneamente, ampliamente utilizada como vacuna en el control de la brucelosis. No se conocen aun los genes afectados que dan el fenotipo avirulento. Con el objeto de aislar estos genes, se conjugo en masa (de a cien clones) la cepa vacunal con una biblioteca genómica de B. abortus 2308 (cepa salvaje). Las cepas transconjugantes se inyectaron por vía subcutánea en ratones BALB/c y se estudio su recuperación en bazo a las dos semanas posinfección De la selección in vivo se aislaron cinco cósmidos distintos, los que incrementaron significativamente la virulencia de la cepa vacunal en ratón. El cósmido pPat3 que incremento en mayor grado el recuento en bazo (6 x l07) fue secuenciado integramente (5,3 kb). Por homología de secuencia se encontraron genes de la vía del cetoadipato para el metabolismo de los catecoles, un gen con similitud a fipA de Fusobacterium nucleatum, involucrado en la inmunosupresión de linfocitos T y algunos genes de vías biosintéticas universales. Se discute su posible participación en la virulencia de B. abortus.