Mapeo e identificación de péptidos antifúngicos en defensinas putativas de flores del cardo Silybum marianum

AGUSTINA FERNÁNDEZ; MARÍA LAURA COLOMBO; FANNY GUZMÁN; LAURA BAKÁS; ISMAEL MALBRÁN; SANDRA VAIRO CAVALLI

Córdoba

Congreso; XXXII Reunión Argentina / XVI Congreso Latinoamericano de Fisiología Vegetal; 2018

Sociedad Argentina de Fisiología Vegetal

Las defensinas vegetales comparten una estructura α/β estabilizada por cisteína (CSα/β) aunque sus secuencias son muy diversas. A partir de las defensinas DefSm1D y DefSm2 del cardo Silybum marianum diseñamos en forma racional potenciales péptidos antimicrobianos a fin de identificar motivos antifúngicos putativos. A partir de alineamientos múltiples con defensinas de las que se ha reportado la existencia de regiones importantes para la actividad antimicrobiana, de la ubicación de estos en los modelos tridimensionales de DefSm1D y DefSm2 previamente obtenidos y de péptidos generados a través de la base de datos C-PAMP a partir de secuencias de defensinas homólogas, se eligieron los péptidos con mayor score que abarcaban el motivo gama-core (GXCX3-9C) y alfa-core (GXCX3?5C) que podrían contener aminoácidos esenciales para la actividad antimicrobiana funcionando como factores de especificidad. Los péptidos diseñados se prepararon por síntesis química en fase sólida utilizando la estrategia Fmoc, se purificaron y analizaron por HPLC-RP y MALDI-TOF-MS. La actividad antifúngica de los péptidos se determinó en microplaca sobre especies de Fusarium en medio PDB 1/2 conteniendo cloranfenicol con monitoreo de la densidad óptica a 595 nm. Los péptidos derivados del alfa-core de DefSm2 inhibieron el crecimiento de F. graminearum y de F. oxysporum.