Obtención de mutantes de Fusarium graminearum incapaces de producir tricotecenos utilizando una metodología de marcadores escindidos

ISMAEL MALBRÁN; CECILIA A. MOURELOS; BARBARA SCHERM; GLADYS A. LORI; QUIRICO MIGHELI

Tucumán

Congreso; 3° Congreso Argentino de Fitopatología; 2014

Asociación Civil Argentina de Fitopatólogos

El gen TRI5 es el responsable de la síntesis de la enzima tricodieno sintasa que cataliza el primer paso en la ruta bioquímica de la síntesis de tricotecenos. Estos compuestos constituyen el principal grupo de micotoxinas producidas por Fusarium graminearum y están asociados a la expansión de los síntomas de la Fusariosis de la Espiga (FET). Con el objetivo de obtener una cepa incapaz de producir tricotecenos, se utilizó una metodología de recombinación de marcadores escindidos para la supresión del gen TRI5 en una cepa de F. graminearum. Se obtuvieron y caracterizaron por PCR 17 transformantes, el 58,8% resultaron mutantes ?TRI5, el 23,5% ectópicos, y el 17,7% restante no mostraron resultados. Tres mutantes TRI5 vieron afectada su capacidad de expandir los síntomas de la FET en pruebas de patogenicidad a campo, aunque no se encontraron diferencias significativas entre su agresividad y la del aislamiento wild type (F = 3,23). Estos mutantes no acumularon cantidades detectables de tricotecenos en los granos de las espigas inoculadas mientras que la cepa wild type acumuló en promedio 4,48 µg/g, aun cuando estas diferencias no resultaron significativas (F = 0,92). Los resultados obtenidos permitieron comprobar la correcta escisión del gen TRI5 en los mutantes considerados. Estos serán utilizados para la evaluación de una metodología de detección de compuestos orgánicos volátiles precursores de tricotecenos sintetizados por F. graminearum durante la patogénesis.