Dinámica de Fusarium graminearum en Rastrojos de Cultivos Invernales y Estivales mediante Real-Time-PCR

CECILIA A. MOURELOS; ISMAEL MALBRÁN; D.L. MENGUAL GÓMEZ; PEDRO A. BALATTI; P.D. GHIRINGHELLI; GLADYS A. LORI

Río Cuarto

Congreso; VII Congreso Latinoamericano de Micotoxicología; 2013

Asociación Latinoamericana de Toxicología

La Fusariosis de la Espiga de Trigo (FET) es una de las enfermedades fúngicas más importantes que afecta las áreas cerealeras de todo el mundo. En la Argentina, Fusarium graminearum Schwabe [teleomorph Gibberella zeae (Schwein.) Petch], es el principal agente causal de esta patología. Si bien la FET provoca tanto pérdidas económicas como en el rendimiento, el mayor interés en ella, es la habilidad del patógeno de producir micotoxinas (principalmente deoxinivalenol) proporcionando así, una reducción en la calidad de los granos. El objetivo del presente trabajo fue cuantificar y analizar la dinámica de distintos residuos de cultivos de invierno y de verano como fuente de inóculo primario en el campo, aplicando una técnica molecular, rápida y precisa como la Real-time PCR. Sobre los residuos de 7 parcelas de cultivos invernales se implantó mediante siembra directa, soja como cultivo estival. Rastrojos de trigo pan, trigo candeal, cebada, centeno, tritordio (Triticum x Hordeum) naturalmente infectados fueron monitoreados a lo largo de los 18 meses posteriores a la cosecha y los rastrojos de cultivos de soja fueron muestreados a lo largo de los 14 meses posteriores a su cosecha. Antes de la aplicación de técnicas moleculares, se verificó la viabilidad en los distintos residuos de F. graminearum a través de la siembra en medio de cultivo; se identificó mediante técnicas micológicas convencionales y se confirmó la especie por medio de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) especie-específica usando el par de primers FG16N. Se ajustó una metodología de extracción de ADN a partir de los rastrojos para reducir la cantidad de inhibidores en la PCR. Se desarrolló un ensayo de cuantificación por Real-time PCR con el fluorócromo SYBR-Green que permitió determinar el número de copias de genoma del patógeno por gramo de rastrojo. Los resultados obtenidos, indicaron la presencia de inóculo sobre todos los rastrojos evaluados a lo largo del periodo muestreado. Hubo una marcada relación entre la descomposición de los residuos y la cantidad de copias del genoma de F. graminearum cuantificadas. La cantidad de propágulos del patógeno disminuyó con la descomposición de los residuos. La detección de moléculas de ADN del patógeno en los rastrojos de los cultivos pertenecientes a las gramíneas fue mayor en comparación con los de soja. Dentro de los cultivos invernales, el trigo pan y el tritordio fueron los que aportaron mayor cantidad de inóculo primario. Se pudo concluir que la técnica ajustada fue efectiva ya que permitió cuantificar y analizar la dinámica de las fuentes de inóculo en rastrojos de gramíneas y leguminosas, y además demostró que el patógeno permaneció viable en la fuente de inoculo evaluada por más de una campaña. A partir de este trabajo se aporta información clave para reducir las fuentes de inóculo de F. graminearum y establecer estrategias precosecha que tiendan a prevenir la presencia de micotoxinas en la cadena alimentaria.