Efecto protector de melatonina por reducción del receptor tipo 1 de angiotensina en un modelo de enfermedad cardiorenal

PRADO N. J.; CASAROTTO M. ; CALVO J. P.; MAZZEI L. J.; PONCE ZUMINO A. Z.; GARCÍA I. M.; CUELLO CARRIÓN F. D.; FORNÉS M. W.; DIEZ E. R.; MANUCHA W.

Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Congreso; 38° Reunión Anual del Consejo Argentino de Hipertensión Arterial; 2017

Sociedad Argentina de Cardiología

Introducción:La hipertensión arterial es un factor de riesgo cardiovascular común que conduce a enfermedad coronaria, insuficiencia cardíaca y enfermedad renal crónica (ERC), entre las patologías más destacadas. Los pacientes que combinan enfermedad coronaria y ERC sufren arritmias ventriculares frecuentes y potencialmente letales. Por lo tanto, se requieren tratamientos cardioprotectores preventivos específicos. Nuestro laboratorio y otros, han postulado que el remodelado miocárdico y la arritmogénesis se relacionarían con el estrés oxidativo y una menor expresión de receptores de vitamina D (VDR) asociada al incremento en la expresión de los receptores tipo 1 de angiotensina II (AT1). De interés, la melatonina (MEL) sería potencialmente útil como tratamiento preventivo de las complicaciones de los órganos blanco de la hipertensión arterial por su efecto protector contra eldaño oxidativo de los tejidos y, a la vez, restablecería el equilibrio del sistema renina-angiotensina (RAS). Surge así como propuesta original el uso de MEL como protector cardio-renal por modulación del sistema RAS.En este sentido, se destaca que uno de los mecanismos antioxidantes de MEL es el de inducir la expresión de la proteína de choque térmico 70 (Hsp70)-proteína antiapoptótica- que protege el tejido de la toxicidad inducida por el estrés oxidativo. Por otro lado, también se ha demostrado que MEL protege del daño oxidativo inducido por una variedad de agentes tóxicos, procesos metabólicos e inclusive lesión por isquemia-reperfusión. En especial, los efectos protectores de MEL durante la lesión por isquemia-reperfusión fueron vinculados con la vitamina D.Hipótesis:MEL protegería del daño renal y remodelado cardíaco-en un modelo animal de ERC- mejorando la respuesta ante un evento coronario agudo. La protección se debería a la modulación y normalización de las proteínas AT1, Hsp70 y VDR, con la consecuente reducción del estrés oxidativo, fibrosis y apoptosis.La normalización de las proteínas AT1, Hsp70 y VDR por el uso de MEL limitaría los cambios estructurales y prevendría las arritmias por isquemia-reperfusión.Materiales y Metodologías:Como nuestro laboratorio demostrara recientemente, la obstrucción ureteral unilateral (OUU) es un modelo experimental adecuado de ERC con marcado remodelado miocárdico y aumento de la arritmogénesis. Por lo tanto, para el presente trabajo se practicó la OUU a ratas Wistar machos (Código aprobación CICUAL 48/2016). Tanto los animales con OUU como los que tuvieron cirugía simulada (SHAM), fueron tratados con MEL (4 mg/Kg/día/15 días, en agua de bebida) o con agua sin agregados. Las botellas fueron cubiertas con papel aluminio para evitar la degradación por luz de MEL. Quedaron así conformados 4 grupos: SHAM, SHAM+MEL, OUU y OUU+MEL. Cada uno de los 4 grupos incluyó: 5 animales que se utilizaron para los estudios moleculares y estructurales, y 8 animales asignados al experimento de isquemia-reperfusión. Previo a la eutanasia para extracción de tejidos tomamos muestras de sangre para medir ionograma, urea y creatinina. Evaluamos en riñón y corazón: variables moleculares (RT-PCR, WB, IHQ e IFI), histológicas (TUNEL y Tricrómico de Masson), ultraestructurales (microscopía electrónica) y oxidativas (actividad de NADPH oxidasa mitocondrial). Se realizó un protocolo isquemia-reperfusión cardíaca que consistió en un período de 10 minutos de preisquemia, 10 minutos de isquemia regional por ligadura de la arteria coronaria descendente anterior izquierda y 10 minutos de reperfusión. Las arritmias ventriculares fueron clasificadas según convención de Lambeth. Se evaluó la incidencia y duración de la taquicardia ventricular (TV) y la fibrilación ventricular (FV). Se analizó amplitud del potencial de acción, potencial de reposo, duración del potencial de acción (50% y 90%) de la repolarización.Estadística:Los datos se expresaron como media ± SEM y el análisis estadístico se realizó usando ANOVA o ANOVA II de medidas repetidas seguido por post-test de Bonferoni. La incidencia de arritmias se comparó con la prueba exacta de Fisher. Las variables no distribuidas normalmente se analizaron con Kruskal-Wallis seguida de la prueba de Dunn. Se estableció como significativo una P