Expresión diferencial de un gen clave para la metabolización de micronutrientes donantes de metilo en células del oviducto bovino

CESPEDES, ME; GARCIA, EV; GOMEZ, P; BINDA, JA; BARRERA, AD

Salta

Encuentro; III Encuentro de la Red Internacional Universitaria para el Desarrollo de la Investigación y las Publicaciones Científicas (ERII) y XVII Jornadas de Investigación, Desarrollo e Innovación de UCASAL.; 2023

La comunicación materno-embrionaria tiene un rol crucial para el establecimiento ymantenimiento de la preñez en mamíferos. Durante la embriogénesis temprana, esteintrigante diálogo comienza en la ventana de tiempo en la cual el embrión transita por eloviducto. Por lo tanto, diferentes moléculas bioactivas presentes en el microambienteoviductal y derivadas de la nutrición materna pueden intervenir en esta comunicaciónespecializada y contribuir a la preparación del ambiente óptimo para el inicio del desarrolloembrionario. El folato y la vitamina B12 son micronutrientes necesarios para la maquinariaque regula la epigenética y la expresión génica por lo que pueden tener un rol importante enla modulación de señales entre el oviducto y el embrión. Si bien se sabe que las célulasepiteliales del oviducto bovino (BOECs) expresan receptores y transportadores para estosmicronutrientes, aún resta determinar si estas células oviductales cuentan con loscomponentes moleculares del metabolismo celular en el que participan. La actividad de laenzima metionina sintasa (MTR) es dependiente de folato y B12, y esta vincula el ciclo delfolato con el de la metionina, garantizando la disponibilidad de grupos metilo para laremetilación de homocisteína a metionina y la síntesis de S-adenosilmetionina (SAM) paralas marcas epigenéticas de metilación. Además, se han asociado algunas mutaciones en sugen con problemas reproductivos de infertilidad o subfertilidad tanto en animales domésticoscomo en humanos. Basado en lo descripto, el objetivo de este trabajo fue analizar los niveles de expresión del gen MTR en BOECs derivadas de diferentes regiones anatómicas y etapasdel ciclo estral. Para ello se procedió a la obtención de tractos reproductivos de hembrasbovinas faenadas en frigoríficos locales y a su transporte en frío hasta el laboratorio. La etapadel ciclo estral se determinó mediante evaluación de la morfología ovárica y los oviductosipsilaterales al ovario activo se clasificaron en tres grupos: a) estadio preovulatorio (Pre-ov),b) estadio postovulatorio (Post-ov) y c) estadio luteal medio (Mid-L). Luego, se procedió aobtener las BOECs mediante presión mecánica de la región del ámpula y del istmo porseparado y posteriormente se llevó a cabo la extracción y cuantificación del ARN total, lasíntesis de ADNc y la cuantificación relativa de la expresión génica mediante qPCRempleando el termociclador ABI QuantStudio 5. La expresión de MTR en las diferentesmuestras se relativizó al gen de control endógeno ACTB. Se determinaron nivelestranscripcionales de MTR más elevados en la región del istmo durante la etapa Pre-ovrespecto a la región del ámpula (p