Respuesta transcripcional de genes relacionados con la actividad antioxidante y la apoptosis en células del epitelio oviductal bovino a diferentes niveles exógenos de folato

GOMEZ, P; GARCIA, EV; CESPEDES, ME; BINDA, JA; FURNUS, C; BARRERA, AD

Encuentro; III Encuentro de la Red Internacional Universitaria para el Desarrollo de la Investigación y las Publicaciones Científicas (ERII) y XVII Jornadas de Investigación, Desarrollo e Innovación de UCASAL.; 2023

El metabolismo del folato es esencial para múltiples procesos fisiológicos a nivel celular.Entre estos se incluyen la biosíntesis de ácidos nucleicos, el metabolismo de aminoácidos, laregulación epigenética, la protección antioxidante y la supervivencia y crecimiento celular.Dadas estas importantes funciones, se sabe que el folato tiene una participación crucial eneventos reproductivos que tienen lugar en el ambiente intrauterino. Sin embargo, aún sedesconoce su impacto en el ambiente oviductal, donde acontecen las primeras etapas deldesarrollo embrionario preimplantacional. En estudios previos, se ha demostrado la presenciade folato en el fluido oviductal bovino y la expresión de genes asociados a su internalizaciónen las células epiteliales del oviducto bovino (BOECs). Asimismo, recientementedeterminamos variaciones de la expresión génica de las principales enzimas implicadas en elciclo del folato, la cual es dependiente fundamentalmente de la etapa del ciclo estral. Estoevidencia que el oviducto bovino dispone de la maquinaria necesaria para metabolizar elfolato, lo que lleva a pensar que este micronutriente podría influir en la funcionalidad oviductal. Es por ello que el objetivo de este trabajo fue evaluar la respuesta de las BOECs adiferentes niveles extracelulares de folato, centrando el estudio sobre posibles cambiostranscripcionales de genes involucrados en el mantenimiento de la homeostasis redox y laapoptosis celular utilizando un modelo de cultivo celular in vitro. Las BOECs se obtuvieronpor presión mecánica de oviductos en fase preovulatoria y posteriormente, se cultivaron ensuspensión durante 24 h. En este tipo de cultivo en particular las células forman agregadoscelulares tridimensionales (esferoides), conservando características morfológicas ymoleculares del oviducto in vivo. Una vez obtenidos los esferoides, se los cultivó durante 24h con diferentes concentraciones de ácido fólico (AF): 1 μM, 10 μM y 100 μM. Se trabajóademás con un grupo control sin suplementación. Luego, mediante RT-qPCR se evaluó laexpresión génica de enzimas antioxidantes tales como SOD1, SOD2, CAT, GPX1, GPX4,CBS y GSS; y de genes involucrados en la regulación de la apoptosis celular tales como BCL2y BAX. Como resultado se determinó un incremento en los niveles de expresión de SOD1 yCAT en respuesta a la adición de 10 μM de AF al medio de cultivo. Asimismo, seincrementaron los niveles de expresión de CBS en respuesta a las concentracionesextracelulares de 1, 10 y 100 μM de AF. Por otra parte, se observó que la relación BCL2/BAXse vio aumentada en las células tratadas con AF. Estos datos nos permiten concluir que lasfluctuaciones en los niveles de folato extracelular pueden promover cambios a nivelmolecular en las BOECs, contribuyendo a mantener el equilibrio redox y la supervivenciacelular, procesos esenciales para un correcto funcionamiento celular. Esto es indicativo delimportante rol que el folato podría tener en el contexto oviductal.