Aplicación de la PCR en tiempo real como herramienta para detectar variaciones en la expresión de genes de relevancia epigenética en los órganos reproductivos de la hembra bovina

GOMEZ, P; GARCIA, EV; FURNUS, C; BARRERA, AD

Salta

Jornada; XVI Jornadas de Investigación, Desarrollo e Innovación de UCASAL; 2022

Vicerrectorado de Desarrollo e Investigación y el Consejo de Investigación de UCASAL

La PCR es una técnica ampliamente utilizada por su alta sensibilidad y reproducibilidad.Una de las variantes más reconocidas es la PCR en tiempo real que combinasimultáneamente la amplificación y la detección, correlacionando el producto de cadaciclo con una señal de intensidad de fluorescencia lo que posibilita además sucuantificación. El objetivo del presente estudio fue utilizar esta técnica para poderdetectar variaciones en la expresión génica de dos enzimas (DHFR y MTHFR)implicadas en el metabolismo del folato, un reconocido modulador epigenético a nivelcelular. Para ello se trabajó con muestras de diferentes órganos reproductivos (ovario,oviducto y útero) y con células epiteliales del oviducto de hembras bovinas (BOECs)obtenidas de diferentes regiones anatómicas, etapas del ciclo estral y condiciones decultivo in vitro. Se detectó la expresión de ambas enzimas en los órganos reproductivos,y en el caso de las BOECs, se evidenciaron diferencias según la región anatómica, laetapa del ciclo estral y la condición de cultivo in vitro analizada. Por lo tanto, la PCR entiempo real proporciona una herramienta muy útil para detectar variaciones en laexpresión génica, que por la técnica convencional de PCR de punto final no sonposibles de determinar.