La bacteria entérica Escherichia coli producotra de toxina Shiga (STEC) estimula una respuesta proinflamatoria en neutrófilos humanos

SABBIONE, FLORENCIA; SHIROMIZU, CAROLINA MAIUMI; KEITELMAN, IRENE ANGÉLICA; VEREERTBRUGGHEN, ALEXIA; VERA AGUILAR, DOUGLAS; RAMOS, MARÍA VICTORIA; FERNANDEZ BRANDO, ROMINA; JANCIC, CAROLINA CRISTINA; GALLETTI, JEREMÍAS G.; PALERMO, MARINA; ANALÍA, TREVANI SILVINA

Buenos Aires

Simposio; 1° Simposio argentino sobre Escherichia coli productor de toxina Shiga (STEC/VTEC) responsable del Síndrome Urémico Hemolítico; 2022

Los neutrófilos son leucocitos clave en la defensa anti-bacteriana. Además, contribuyen a la respuesta inmune secretando citoquinas y mediadores proinflamatorios. En respuesta a infecciones por Escherichia coli productora de toxina Shiga (STEC) potencial causante del Síndrome Urémico Hemolítico (SUH), los neutrófilos son reclutados al intestino. Dado que la translocación de la toxina Shiga (Stx) a la circulación podría ser facilitada por la inflamación, el objetivo de este trabajo fue investigar si los neutrófilos pueden contribuir al desarrollo de la respuesta inflamatoria a través de la secreción de citoquinas proinflamatorias. Para ello, los neutrófilos fueron aislados de sangre periférica de dadores sanos por Ficoll-Triyosom, sedimentación en Dextrán y lisis hipotónica. Luego fueron incubados con E. coli de la cepa 0157:H7 productora de Stx2, con una cepa isogénica que no produce la Stx (O157:H7ΔStx2) o con una cepa no patógena (C600) a diferentes multiplicidades de infección (MDI). A distintos tiempos post-desafío se determinaron la secreción de citoquinas al sobrenadante por ELISA, la viabilidad de los neutrófilos por la determinación de LDH en sobrenadantes y se investigaron los mecanismos moleculares que conducen a la secreción de IL-1β. Los resultados fueron analizados por ANOVA o t de Student. Los neutrófilos secretaron niveles significativos de IL-1β, CXCL8 y TNF-α en respuesta a STEC a todas las MDI evaluadas (0,5-50), siendo la liberación de IL-1β y de TNF-α mayor cuanto menor fue la MDI (n=6; p