Nuevo método para cuantificar la aglutinina de germen de trigo

BAIELI, MARÍA FERNANDA; URTASUN, NICOLÁS; HIRSCH, DANIELA BELÉN; MIRANDA, MARÍA VICTORIA; CASCONE, OSVALDO; WOLMAN, FEDERICO JAVIER

Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Congreso; III Congreso Latinoamericano de Farmacia y Bioquímica Industrial. XII Jornadas de Farmacia y Bioquímica Industrial; 2015

SAFyBI

Las lectinas son proteínas de origen no inmune presentes en plantas y animales. Tienen la particularidad de interaccionar de manera selectiva con hidratos de carbono libres o asociados a proteínas y por lo tanto la capacidad de aglutinar eritrocitos. La aglutinina de germen de trigo (WGA) es una lectina de aproximadamente 35 kDa que a pH ácido se disocia en dos subunidades idénticas de 17 kDa. Del aislamiento de esta lectina se obtiene una mezcla de 3 formas moleculares o isolectinas, las cuales difieren en su composición de aminoácidos, movilidad electroforética y afinidad por algunos oligosacáridos que contienen ácido siálico. Tiene reconocimiento específico por el ácido N-acetil neuramínico y por N-acetil glucosamina. Al ser una proteína estructuralmente compleja con elevado contenido de cisteína su expresión por técnicas recombinantes es dificultosa, por lo que las metodologías extractivas a partir del germen de trigo siguen siendo la estrategia dominante para su obtención. La WGA es una proteína de alto valor agregado con un mercado creciente debido a sus múltiples usos para la purificación y el estudio de glicoconjugados.Uno de los requerimientos del downstream processing es la necesidad de contar con métodos para el seguimiento y control de calidad de los procesos de purificación y bioproductos obtenidos que resulten sencillos y agiles. En este sentido en el presente trabajo se desarrollo un nuevo método de seguimiento mediante RP-HPLC para la cuantificación de WGA y se comparó con el ensayo de actividad aglutinante sobre eritrocitos humanos.